4篇连发,篇篇9分+的文章到底是怎么炼成的?

2021-02-04 11:44:27, 多层组学定制服务 上海欧易生物医学科技有限公司


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欧易/鹿明生物合作客户西南科技大学环境与资源学院罗学刚课题组在植物重金属胁迫研究方面深耕多年。4篇植物重金属胁迫研究连发,涉及到的组学研究LC-MS代谢组学,GC-MS代谢组学,转录组测序技术


本篇小鹿特邀一作作者赖金龙老师分享研究心得,看看4篇连发,篇篇9分+的文章到底是怎么炼成的?


(文章解读详情请点击以下链接)

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实验方案设计

小鹿导读

古人云“凡事预则立、不预则废”。想要发表高水平文章,在最初的实验设计阶段,就要考虑到方方面面。将本领域其他研究手段与组学技术有机结合,围绕着研究的实验目标去设计实验,绝对是事半功倍的不二法宝。老师对于整个实验思路的把控,非常值得我们学习和借鉴。下面我们来看一看一作作者怎么说吧~~


1

针对一个课题,尤其是打算进行连续研究,如何设计组学实验?


高通量数据信息很丰富,一篇文章只能展示出部分数据结果。同时生理代谢也很复杂,如基础代谢、次级代谢等。每一个代谢途径,都可以结合生理分析和组学数据进行解析相关机理,这就需要对实验有整体规划。就拿这几篇为例,做测试前就规划好,第一篇文章主要是公开组学数据,根据生理分析结果,重点梳理与生理代谢相关的组学数据。第二篇文章就是以第一篇文章数据为基础,从另外一个生理代谢角度再次进行数据的挖掘和分析。



2

几篇文章中都涉及到大量环境组学实验(光合/呼吸代谢、植物形态、元素分析等),设计这些实验的原则是什么?这些数据和组学数据是如何有机结合在一起的呢?


(1)选择的原则就是一篇文章自己想阐述的科学问题是什么,实验假设是什么。根据实验假设选择相应的实验指标。例如,第一篇实验假设是围绕矿质代谢在设计试验。第二篇则是围绕光合碳代谢和呼吸代谢在设计试验。

(2)做组学实验之前,就要规划好从哪一个切入点进行研究,这样挑选高通量数据才有目的性。而不是拿到一堆数据后,再思考哪里可以用来写文章,这样有可能造成生理指标与组学数据不能相互印证,文章结构不合理,数据分析不到位。



3

您发表的第三、四篇文章考察了两种重金属元素的影响。为什么会在铀元素的基础上选择考察镉元素的影响?


铀尾矿污染区属于典型的复合污染源,其污染物可以分为两大类:一是放射性核素,如铀、钍、镭、氡等;二是伴生重金属,如铅、镉、锰等。我们课题组长期开展铀及伴生重金属环境生物学效应及修复的研究。前期重点研究了单一铀污染,后期就开展了复合污染研究,这里就选择了毒性较强、具有代表性的伴生重金属镉。


4

对于铀/镉复合污染研究,研究侧重点转变为元素/离子分析和代谢组/转录组联合分析,对于这两篇文章,研究的异同点在哪里?


针对铀镉复合污染研究,整个课题设计是采用多组学解析植物铀镉累积机理及生理响应策略。研究选择了高、低两种甘薯品种进行对比分析,组学的测试内容包括两个品种的代谢组学转录组学,而我们自己在做植物全生育期元素和离子组分析。第三篇文章从代谢组水平解析了甘薯铀、镉互作机理。刚发表的文章就是从对比转录组学的角度,解析两个品种植物铀、镉吸收机理和生理响应策略。


实验技术选择

小鹿导读

工欲善其事,必先利其器。组学技术是分子机制研究的有效手段,如何选择合适的组学技术,深入地进行研究,老师给出了自己的看法。


1

在您的四篇文章中,选择了转录组或非靶代谢组进行研究,可以分享一下选择的依据和理由麽?


植物对生物或者非生物胁迫的生理响应过程比较复杂,涉及基因表达水平(转录组)、蛋白质合成(蛋白组)和代谢产物调控过程(代谢组)。样本在转录组水平的变化,可以预示可能出现的生物学效应;代谢组学则反映了样本正出现的生物学效应。因此两个组学结合起来分析,可以相互验证代谢水平的变化及其分子机理。这两种技术相对比较成熟、数据质量可靠,也是我们做出选择的重要原因。



2

代谢组学平台分为GC-MS和LC-MS两种,我们注意到发表的四篇文章中,有3篇文章使用了非靶代谢组学技术,但是选择的代谢平台有所侧重。请您谈一谈两种平台的选择经验。


第一、二篇文章选择了GC-MS和LC-MS两种平台分析代谢组的变化,目的是获取植物铀胁迫响应的完整非靶向代谢数据。经过后期数据分析发现,两种技术都能检测到相似的差异代谢产物。与GC-MS相比,LC-MS鉴定得到的代谢产物数量更多,获取的数据信息与我的研究内容更契合,因此后续文章选择了LC-MS进行分析。当然想获取完整的非靶向代谢数据,GC-MS和LC-MS联用肯定是最佳选择。



文章撰写和投稿

小鹿导读

他山之石,可以攻玉。一篇高水平文章的发表过程,并不总是一帆风顺。在这里,老师毫无保留地分享了投稿中遇到的问题,也总结了宝贵的经验,一定会给您带来新的启发和思考。


1

针对一个课题的系列研究,如果发表多篇论文,在投稿时应该注意什么?


在这里分享一个投稿经验,在投稿评审过程中,审稿人会询问几篇文章异同点在哪里?因此在写文章时,在前言和讨论部分就要进行详细的论述。

2

在您的文章中,讨论部分思路很清晰,结论也条理分明和严谨。您是怎样把生理参数、元素含量等实验数据和代谢\\转录数据结合进行解释和讨论的?


讨论是对结果进一步解释,也是文章最难的地方。其实生理参数、元素含量都是属于代谢水平,如矿质营养代谢、光合代谢、呼吸代谢等。代谢组学能够提供这些代谢途径中小分子代谢产物含量的变化。通过结合代谢产物含量的变化,可以解析生理参数变化的内在机理。同理转录组数据就是从基因表达的角度解析相关机理。对这些高通量数据的解析,我们一定要熟悉生化代谢途径相关产物、酶及调控基因,这样才能快速检索到相关数据。



3

在您的文章中,表格数据丰富,绘制的图质量很高,在这方面您有哪些心得?


组学数据的呈现方式也很重要,公司给的测试结果报告属于标准流程分析,一定要对数据图表进行二次排版,我在这几篇文章中,制图花的时间最多,甚至几个晚上才能绘制一张图表。庆幸的是,审稿人对论文高质量版图都给出了很高的评价。所以,强烈建议制作好每一个图表。我最常用的制图软件就是Excel2010,非常方便,又是矢量图,后期排版线条可以随意更改、组合。Excel绘制不了的图我选择origin。排版采用AI软件。组学数据的分析我常用的就是一些在线分析平台,基本属于傻瓜式操作。



专家简介

罗学刚教授在生物质资源开发、生物质材料、污染控制与生物修复等方面作了大量的研究工作,近5年,主持和完成《矿冶重金属废水生物质吸附材料的研制与应用》等国家科技支撑计划项目、国家863计划项目、国防科技创新团队专项等重点项目10余项。主持研究的《高纯木素的提取与产业化应用开发》等8个项目通过成果鉴定:部分成果处于国际同类研究先进水平。获国家发明专利授权10项。发表学术论文100余篇,其中被SCI、EI检索60余篇,出版专著1部,部分成果已在化工、矿冶、材料、环保和石油等行业推广应用。


一作作者:赖金龙博士,西南科技大学环境与资源学院博士研究生,专注于污染环境生物效应与修复方向,对于植物的抗逆研究与环境污染方面有丰富的研究理论知识,善于将组学技术与课题研究相结合,探讨研究机制机理。

本文由鹿明生物报道,如需咨询鹿明生物更多组学研究。请添加微信或者拨打手机号17317724501(微信同号)咨询鹿明生物技术工程师更多组学实验设计方案。


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END

嫣然  撰文

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本文系鹿明生物原创

转载请注明本文转自鹿明生物

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