避坑攻略 | 蛋白/代谢组学样本收集与保存7大注意盲区

一要求

七要素

动物组织（包括脑、心、肝、脾、肺、肾、肌肉和皮肤等；软体动物如血吸虫）：

1）取适量组织器官，用预冷的PBS缓冲液或生理盐水清洗干净；

2）迅速剥去非必需的脂肪和结缔组织，再用PBS缓冲液或生理盐水冲洗干净；

3）用干净的无尘吸水纸吸干水分，将组织分成50-100 mg / 管分装待用；

4）管子上做好标记后速冻处理，-80 ℃冻存；干冰运输。

温馨提示：

1.对于动物组织样本无法满足50mg/样，如海马组织，大脑组织等，可考虑同组混样以达到50mg/样的要求。

2.尽量不要使用锡箔纸以及自封袋包装样本，建议将样本液氮研磨后使用离心管/冻存管进行分装。

3.在使用PBS缓冲液/超纯水进行漂洗时，需要尽快处理。

PBS洗涤去除残留血液和污染物，剔除无关的干扰组织（血管、脂肪、结缔组织等）；

冲洗干净，用组织剪或手术刀将组织分离成1cm³左右的小块；

液氮速冻5min，保存于-80℃，干冰运输。

——心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌肉等样本

注意：

1）对于人体手术切除的组织，最好用PBS（磷酸缓冲盐溶液，作为溶剂，起溶解保护试剂的作用）取完之后直接去血。

2）对于小鼠、大鼠、兔子之类的组织样品，建议用灌流的方式来去血，尤其是像肝脏、胃、心脏这类大的组织，可以直接用灌流的方式去血，去得最干净。其次的方案是在后期剪碎的时候去血。

3）对于组织重量远低于100 mg的样本，如斑马鱼大脑组织、小鼠海马组织等，可考虑混样。

尽量选择大小相近的样品，将样品表面清洗干净，清除泥沙，将样品存放于离心管，较大的样品用手术刀将软骨切成1cm³左右的小块；

液氮速冻5min，保存于-80℃，干冰寄送。

尽量选择大小相近的样品，将样品表面清洗干净，清除泥沙，将样品存放于离心管，较大的样品可剪成小块后存放；

液氮速冻5min，保存于-80℃，干冰寄送。

——软体动物贝壳等

用适量2%SDS，50mM 磷酸钠（pH7.8）缓冲液漂洗样品或用PBS进行清洗，去除污染物，干燥；

液氮速冻5min，保存于-80℃，干冰寄送。

常规动物组织（心、肝、脾、肺、肾、肠、脑、肌肉等）-定量蛋白组学>200mg；修饰蛋白组学>500mg

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