动脉粥样硬化小鼠模型如何建立？

动脉粥样硬化是血管病中常见的最重要的一种，其特点是受累动脉病变从内膜开始。一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，纤维组织增生及钙质沉着，粥样斑块中的钙化会降低斑块的完整性，并会增加破裂和随后发生急性心肌梗死的风险。由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样，因此称为动脉粥样硬化。

心脑血管疾病是当前威胁人类健康的第一杀手，在当前快节奏的生活，高油脂的外卖、抽烟、熬夜等因素，将原本在老年群体易发疾病，在广大年轻群体也扩散开来，高强度的工作，加之缺乏锻炼，近些年年轻人猝死的报道屡见不鲜。由此可见，针对心脑血管疾病的治疗手段开发越来越迫切！！

药物的开发离不开的动物模型，科学家常以高胆固醇食物长期喂食小鼠以建立动脉粥样硬化钙化小鼠；也可以通过将 C57BL/6 小鼠与缺乏低密度脂蛋白受体 ( Ldlr ) 或载脂蛋白 E ( Apoe ) 的小鼠杂交获得小鼠模型，但前者可能需要较长的时间，而后者则需要研究者有遗传缺陷鼠，对于大部分研究者而言，这并不是一件易事。

单次注射编码功能获得性突变形式的前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9 (PCSK9) 的重组腺相关病毒载体 (AAV) 与致动脉粥样硬化饮食相结合长达 24 周可诱导小鼠和仓鼠的动脉粥样硬化。来自哈佛医学院的研究团队，以C57BL/6J 小鼠、 LDL 受体缺陷小鼠 ( Ldlr^-/-)、以及重组鼠 PCSK9 腺相关病毒 (10 周大的小鼠通过尾静脉给予 10¹¹个 pAAV/D377Y-mPCSK9 病毒颗粒，并以生理盐水作为对照) ，此后，给小鼠喂食20周的高脂肪、高胆固醇 (HF/HC) 饮食（21% 脂肪和 1.25% 胆固醇：

在 AAV 注射之前和 1、2、5、10、15 和 20 周从（下颌下）面部静脉采集血液，进行一系列生化指标的分析可知：Ldlr^-/-与pAAV-PCSK9均影响了肝脏中的LDLR水平（图1D），以及提升了总胆固醇水平（图1E）。

接受pAAV-PCSK9和 HF/HC 饮食 15 周和20 周的小鼠在主动脉窦出现动脉粥样硬化病变，其大小与Ldlr^-/-小鼠相似。在小弯处，20周的pAAV-PCSK9比Ldlr^-/-小鼠的病变更小。而食用 HF/HC 饮食20 周的生理盐水对照小鼠未出现动脉粥样硬化病变。pAAV-PCSK9注射后15 或 20 周导致主动脉瓣叶增厚，类似于在Ldlr^-/-小鼠中看到的情况。

然后，研究团队进一步评估了pAAV-PCSK9对 小鼠血管钙化的影响。NIRF 钙示踪剂在完整动脉中的荧光反射成像检测到所有8只 HF/HC 饮食20周的pAAV-PCSK9小鼠的血管钙化 (12.4±4.9 %) 。钙化区域与 HF/HC 饮食15周的Ldlr^-/-小鼠相似（15.3±6.1%）。但20周的Ldlr^-/-小鼠出现更多的钙化 (31.6±4.1%)。

单次尾静脉注射AAV的PCSK9 (D377Y) 的功能获得形式和 HF/HC 饮食不需要基因改造，吉凯基因为众多研究心血管疾病的客户提供了该腺相关病毒现货，从下单到收到病毒只需要十五个工作日。这种方法可以通过避免将转基因小鼠品系与易患动脉粥样硬化的品系Ldlr^-/-或Apoe^-/-小鼠进行耗时、劳动密集和昂贵的杂交，从而加快血管钙化的呈现。

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