【上新】拖慢你实验脚步的TA克隆新解法

2023-07-11 16:17:30, TIANGEN



高考都结束了

科研人的科研生活还在继续

最惨的就是

这一周都在设计引物、扩增目的片段的我

刚接到导师的通知

让我下周一汇报结果…

师姐,老师周一就要我的克隆结果,那我这周岂不是无休了?



啊!这都周五了……你现在做到哪步了?

我刚扩增完目的基因,准备用试剂盒过夜连接了。



之前的试剂盒不大好用啊,我过夜连接完就长了10个克隆子,还都不对。

那我周一怕是连结果都没有了。



你们还用原来那个TA克隆试剂盒呢?用这个啊,5 min快连而且菌斑数阳性率超高。

哇,快让我试试~


10H later……

师兄,这个试剂盒太棒啦,5min就把片段和载体连完了,菌斑不光长得很多,还全是阳性的,我这就送测序,周一就有结果啦!我要去开启我的多巴胺周末啦~



pLB-T Fast 连接试剂盒

(pLB-T Fast Ligation Kit)(VT217)

高效快速

5 min快速连接,阳性率超过95%。


灵敏高效

适合低至0.025 pmol浓度片段和长至3 kb片段的高效连接。


操作便捷

配合使用新型RapiLigation Mix,只需加入载体和片段即可进行连接反应。


应用面广

可高效克隆各种PCR产物和任何具有粘性末端的DNA片段,对磷酸化或非磷酸化的DNA片段都有效。


操作流程

在无菌环境下混匀内容物,短暂离心3-5 sec后于22℃反应5 min。反应结束后,将离心管置于冰上,进行后续的转化反应。

实验例

不同片段长度&不同保存条件的连接阳性率比较


按片段与载体摩尔比3:1比例加入片段和载体,连接温度及时间按相应产品说明书进行。


结果显示:688 bp的片段只需5min即可以连接到载体中,阳性率超过95%。

pLB-T Vector图谱和多克隆位点

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