新品速递|氨基酸高通量分析新突破!精准定量100种氨基酸及其衍生物!

2023-07-11 16:09:57, 质谱创新组学 上海欧易生物医学科技有限公司


氨基酸是构成生物体蛋白质并同生命活动有关的最基本的物质,是在生物体内构成蛋白质分子的基本单位,与生物的生命活动有着密切的关系,它不仅提供了合成蛋白质的重要原料,而且对于促进生长、进行正常代谢、维持生命提供了保证,是维持内稳态重要的物质基础。人体内参与氨基酸代谢的相关蛋白和酶发生缺陷,会引发氨基酸代谢疾病,目前氨基酸代谢障碍所引起的疾病已超过400多种。各种病理状态也会引起氨基酸代谢异常,导致血液和尿液中的氨基酸浓度发生异常变化。


「 氨基酸检测意义 」


氨基酸涉及代谢、肿瘤、免疫、心血管、神经系统、肾病、糖尿病、亚健康、老年病等各类疾病和人体生长发育、营养健康、肌肉骨骼生长、激素分泌、解毒功能的各个健康环节。


01
谷氨酸


谷氨酸参与蛋白质、多肽及脂肪酸的合成,是一种常规氨基酸,可与其他氨基酸相互转化;与谷氨酰胺一起调节体内氨-水平;涉及脑内的很多重要生理功能(神经元和胶质细胞的增殖、发育、存活与死亡;学习和记忆密切相关的长时程增强效应 (LTP) 和长时程抑制效应 (LTD) 突触传递效率的可塑性变化);可以用于治疗肝性昏迷,改善儿童智力发育用于生发剂,能被头皮吸收,预防脱发并使头发新生,对毛乳头、毛母细胞有营养功能,并能扩张血管,增强血液循环,有生发防脱发功效。用于皮肤,对治疗皱纹有疗效。


02
丝氨酸


在脂肪和脂肪酸的新陈代谢及肌肉的生长中发挥着作用,因为它有助于免疫血球素和抗体的产生,维持健康的免疫系统也需要丝氨酸。丝氨酸在细胞膜的制造加工、肌肉组织和包围神经细胞的鞘的合成中都发挥着作用。


03
天冬酰胺


天冬酰胺可作为钾、镁离子的载体向心肌输送电解质,改善心肌收缩功能;参与鸟氨酸循环,促进氧和二氧化碳生成尿素,降低血液中氮和二氧化碳的量,增强肝脏功能,消除疲劳……


对氨基酸进行检测和分析除了可以揭示人体内氨基酸代谢状态、警示生理功能紊乱、早期预警多种疾病,还可以提示人体的营养健康的状态,为养生、保健和治疗提供指导和参考;此外,大量研究揭示以特定氨基酸为代谢标记物可成功预测癌症的发生。


图1. 氨基酸代谢图途径


「 产品介绍 」


液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)技术是常用的检测分析手段之一,由于其专属性强、灵敏度高、分析速度快等优点,近年来与临床诊断、监测等的结合越来越紧密和深入,备受质谱分析学者和医学研究者的青睐,临床质谱也因此得到迅速发展。为了提供更好的服务,鹿明生物针对氨基酸开发了一种高通量、高覆盖度、高灵敏度的靶向定量方法,可在21分钟对100种氨基酸及其衍生物进行精准定量分析。通过一次分析,同时定量多种氨基酸水平,有效节省人力物力,提高通量的同时也能够满足临床实验室大多数氨基酸的检测要求。


【优势1】高覆盖度,涉及100种氨基酸及其衍生物

一针进样,同时定量分析100种氨基酸及其衍生物,通过加入同位素内标校正,对血清、血浆、尿液、粪便动植物组织等样本进行精准定量。


【优势2】高通量

使用非衍生化的前处理方法:简单、快捷、通量高、可以满足临床大队列样本分析需求;使用HILIC体系,避免氨基酸类强极性化合物过早出峰,提高分离度和峰型。

 

图2. 部分氨基酸EIC图


【优势3】高准确度

通过全标准品+多种同位素内标方法开发建立,采用业内公认的定性定量黄金标准方法-MRM扫描模式+随行标准曲线及同位素内标法定量保证分析结果的准确性。


【优势4】严格质控

鹿明实施严格的质控体系,在线性、回收率、准确度和精密度等方面都能满足严格的分析要求。所有代谢物的线性回归方程相关系数R2均大于0.99,且各浓度点的准确度均在80%~120%之间。加标回收率实验低浓度质控LQC和高浓度质控回收率满足80%~120%的要求,日内、日间(1天,3天,5天)、批间精密度实验中,低质控和高质控的RSD也都控制在±15%以内。


图3. 100种氨基酸及其衍生物准确度


图4. 100种氨基酸及其衍生物日内精密度


图5.100种氨基酸及其衍生物日间精密度

 

图6.100种氨基酸及其衍生物标准曲线


「应用范围 」


1、氨基酸与遗传代谢

苯丙酮尿症 

白化病


2、氨基酸与孕产妇营养状况

3、氨基酸与肿瘤

氨基酸代谢改变对肿瘤抑制作用的调控机制


4、氨基酸与慢性肾病

5、氨基酸与血液透析患者

6、氨基酸与糖尿病


ps:图片来自网络,如有侵权请联系删除

参考文献

[1] G. Hermann, M. Schwaiger, P. Volejnik, G. Koellensperger,13C-labelled yeast as internal standard for LC–MS/MS and LC high resolution MS based amino acid quantification in human plasma,Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,Volume 155,2018,Pages 329-334,ISSN 0731-7085,https://doi.org/10.1006/j.jpba.2018.03.050.

[2] Prinsen, H.C.M.T., Schiebergen-Bronkhorst, B.G.M., Roeleveld, M.W., Jans, J.J.M., de Sain-van der Velden, M.G.M., Visser, G., van Hasselt, P.M. and Verhoeven-Duif, N.M. (2016), Rapid quantification of underivatized amino acids in plasma by hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) coupled with tandem mass-spectrometry. J Inherit Metab Dis, 39: 651-660. https://doi.org/10.1007/s10545-016-9935-z.

[3] Nina Sillner, Alesia Walker, Eva-Maria Harrieder, Philippe Schmitt-Kopplin, Michael Witting,Development and application of a HILIC UHPLC-MS method for polar fecal metabolome profiling,Journal of Chromatography B,Volume 1109,2019,Pages 142-148,ISSN 1570-0232,https://doi.org/10.1006/j.jchromb.2019.01.016.


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文末看点lumingbio


上海鹿明生物科技有限公司是欧易生物旗下从事蛋白质组代谢组质谱检测专业质谱组学服务公司。公司建有国内第一个空间代谢组商业服务平台,深耕质谱组学检测分析,具体包括空间代谢组、双平台代谢组、靶向代谢组、TMT标记定量蛋白组、翻译后修饰蛋白组、4D-DIA蛋白组、单细胞及超微量蛋白组、空间蛋白组等。创新质谱组学平台广泛应用于机制解析、分型诊断、标志物筛选、药靶发掘等多个领域。公司并先后获得高新技术企业、上海市专精特新企业并建有院士专家工作站,自有包括tims tof pro2在内的各类大型质谱近二十台套,年服务项目超2000项。鹿明生物协助合作伙伴发表SCI论文近千篇,成功打造以硬数据、好服务为基础,以空间代谢组为特色的质谱组学检测服务公司品牌。



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YINA 撰文

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