热点应用丨把荧光强度做成“尺”--硫酸奎宁的线性度量

2026-01-15 12:43:27, 天美


硫酸奎宁是从茜草科金鸡纳属(Cinchona)树皮中提取的天然生物碱--奎宁的酸式盐。自17世纪被欧洲传教士带入旧大陆后,它一直是人类对抗疟疾的“第一药物”,并被誉为“拯救世界的树皮”。

20世纪中叶,随着合成抗疟药(氯喹、伯氨喹)及青蒿素问世,奎宁逐渐退居二线,但其“刚性喹啉-喹核苷醇”骨架赋予其高荧光量子产率(≈0.55)与优异光稳定性(在常规氙灯照射剂量范围内,连续扫描2h荧光强度下降<1%)。美国NIST与我国计量院均把硫酸奎宁溶液列为有证标准物质,用于荧光分光光度计的强度校准与线性验证。

(图片来源于网络)


试剂样品

0.05mol/l的硫酸溶液、不同浓度的硫酸奎宁溶液(1x10-7 g/mL、4x10-7 g/mL、8x10-7 g/mL、1x10-6 g/mL、1x10-9g/mL)。

测试试剂样品


仪器和设备

爱丁堡分析荧光分光光度计FE30、标准荧光比色皿。

FE30荧光分光光度计


测试条件

0.05mol/L硫酸溶液为空白溶液,激发波长:350nm,发射波长:450nm(以实测峰值波长为准)左右,激发和发射带宽10nm,选择合适的PMT值。


测试结果

1.线性的测试

4种质量浓度硫酸奎宁标准溶液(1x10-7 g/mL、4x10-7 g/mL、8x10-7 g/mL、1x10-6 g/mL)与空白溶液进行连续交替三次测量,计算每次测量的荧光强度平均值。用最小二乘法(对4种标准溶液的荧光强度测量平均值进行处理,得到线性相关系数,即为测量线性的结果。

硫酸奎宁溶液的标准曲线(Y=4120X+246.46;R2=0.9991)

2.检出限的测试

对空白溶液与硫酸奎宁标准溶液(1x10-9g/mL)进行连续交替11次测量。读取稳定数值。如果在测量中,有1次数据确认是由外界干扰或操作引起的粗大误差,将该次数据剔除。

由下式计算每次测量的荧光强度:

式中:Fi1 :标准溶液的荧光强度;

         Fi0 :空白溶液的荧光强度。

计算荧光强度测量值的平均值和标准偏差。检出极限值二倍于标准偏差读数的物质浓度,用符号DL来表示:

式中:Fi:11次测量的平均荧光强度;

         c :标准溶液的质量浓度;

         s :单次测量的标准偏差。

表:硫酸奎宁溶液的检出限测试

经计算得到DL(检出限)的值为9.37×10-12 g/mL。


结论

爱丁堡分析品牌旗下荧光分光光度计FE30,以高准确度、良好的线性范围(R2大于0.999)、低检出限(1×10-5 ppm数量级),便捷的软件操作和方法管理为宽浓度范围的样品测试提供测试保障。

爱丁堡分析品牌作为爱丁堡仪器的子品牌,传承英国爱丁堡仪器公司精益求精的设计理念以及荧光分析领域多年技术经验;倾力设计爱丁堡分析品牌旗下FE30荧光分光光度计,并落地上海松江生产制造,致力于为广大分子荧光测试工作者提供高端的进口替代解决方案和全方位技术支持。


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