老生常谈:液相5大模块注意事项

在每瓶流动相中配有过滤器，应定期检查溶剂过滤器是否变色(尤其是盛放水相的溶剂瓶)，定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。对于以下几点流动相部分的注意事项更是在每次使用都应当注意的。

应该使用HPLC级的溶剂，不能互相混溶的溶剂不可以直接切换。一般在水相和与其不能混溶的溶剂切换时，使用异丙醇作为过渡溶剂。

注意溶剂的截止波长。截止波长是指该溶剂可以在紫外检测器中使用的最低波长,低于该波长后,溶剂会有很强的紫外吸收，从而影响基线的稳定性、干扰对所分析物质的检测。

HPLC所使用的水必须是新鲜的和经过0.45μm滤膜过滤过的(RRLC则必须使用0.2μm滤膜过滤)。建议每天更换新鲜的水。长期不用时，必须把使用水的管路用有机溶剂置换，防止长霉。

仪器使用完后要采用适当的溶剂冲洗等方法维护色谱柱和系统。如果使用了缓冲盐一定先将盐要冲洗干净。

仪器长期不用时，最好不要使用纯乙腈封存。因为乙腈有生成聚合物的趋势。建议使用甲醇、甲醇/水或乙腈/水封存。

将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接在下面的梯度阀口上，将有机溶剂接在上面的梯度阀口上。

用水定期冲洗除去可能在阀口析出的盐结晶。

操作泵之前，用至少两个体积(标准脱气机30mL，对微脱气机10mL)冲洗真空脱气机，特别是当泵关闭了一段时间后(例如，过夜)，以及在通道中使用挥发性混合溶剂时。

当使用低流速时（不高于0.2ml/min），检查所有1/16英寸接头有无渗漏（用压力测试或漏液测试）。

更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕，有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命，所以要尽早更换有划痕的活塞。

使用缓冲溶液时，关泵前要先用水冲洗系统。当需要长时间使用0.1摩尔或更高浓度的缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件以减少对密封垫及活塞杆的磨损。

如果使用了高浓度的缓冲盐，可以用热水（50－60℃）来冲洗盐通道来确保没有缓冲盐残留在系统中。

当泵头安装有柱塞清洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10％异丙醇，并将其流速调至约2－3滴/分钟使溶液流过冲洗装置。10％异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶剂代替。

泵头如果发出“吱吱”声不影响使用和泵的精度。

安捷伦1260 Infinity的自动进样器：

样品在进样前必须经过适当的预先处理，需要经过亚微米滤膜的过滤或者离心，防止样品中的微小颗粒堵塞管路。

最好使用流动相作为溶剂配制样品，所用溶剂应该对样品有较好的溶解性。所分析样品在流动相中溶解性不太好时，使用强溶剂溶剂样品容易造成峰形很差的前伸峰。

针座是喇叭口朝上暴露在空气中的，有时空气中的较大灰尘颗粒可能恰好落在针座的流路内而引起针座的堵塞。这时候可以尝试卸下针座，将它接在泵的出口上反冲，一般能解决问题。

ALS一定要使用Agilent的样品瓶及瓶盖；使用不兼容的或者加工精度差的样品瓶及瓶盖会引起ALS故障率的增加及性能的降低。

如果有自动进样器的保温模块，注意冷凝水的管线要保持通畅，并且不要处于废液瓶液面以下。

自动进样器与恒温模块后的控制线，一定要在拔掉电源线后，才可以安装或者移除。

对于赛默飞WPS-3000 Auto sampler(SL)：

当使用专用清洗液瓶时，应在每次开机前将瓶中的溶剂换成脱气的溶剂，并注意检查量是否充足。

使用溶剂通道液体作为清洗液时，应在泵内置脱气机完成流动相脱气及泵排气泡后执行相应的操作，以免引入气体。

样品瓶、多孔板及样品托盘重新放置后，应对其放置是否正确进行确认，以免造成进样针的损坏。

在使用非标准样品容器或衬管时，应注意测量瓶底的高度和宽度并对进样针插入高度进行相应的修改。

对于岛津SIL-20A自动进样器，进样针不容易扎进去进样不平行，这个可以换预开口的隔垫解决。普通的SIL-20A只能耐压20MPa，在使用时注意不要超过压力限。

连接的管路要尽量短，防止热扩散及峰增宽。

如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2mL/min时建议使用左边的柱温箱(左边体积较少,3uL；右边为6uL)，也可使用低扩散组件。

除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。

在使用冷却功能时，要防止因冷凝水而触发漏液传感器。

一般分析柱接到左边3μL内体积的加热块上，半制备柱可以接在右边6μL内体积的加热块上。如果必要，如做GPC（Gel Permeation Chromatography，凝胶渗透色谱分析）等对稳定要求高的分析时，可以将两个加热块串接，得到更好的温度稳定性。

在实验过程中要关好前盖。

换柱的时候，注意螺丝一定要注意，先用手旋紧后，再用扳手旋紧。