No.218｜寡核苷酸的分析利器—CAPCELL PAK ADME-HR 第二期

2022-07-12 21:14:58, YoYo老师三耀精细化工品销售（北京）有限公司

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书接上回，ADME-HR以其独特的金刚烷键合相，展现出高极性与适当疏水性的完美组合，以高比例有机相/低比例水相为流动相，即可实现强极性化合物(如寡核苷酸)在色谱柱上保留和分离，并且，流动相中高比例有机相, 更有利于提高ESI-MS的灵敏度。

为了考察笼状结构ADME与直链结构C18在结构差异的化合物分离上，表现出怎样不同的选择性，我们选取了7种结构上具有相关性的化合物，分别是1、尿苷，2、2’-脱氧尿苷，3、鸟苷，4、5-甲基尿苷，5、2’-脱氧鸟苷，6、阿糖胞苷，7、腺苷。

如下面各化合物结构式图所示，1与2和3与5之间分别有羟基基团的差异，1与4之间有甲基基团的差异，6与7则是一对非对映异构体。

同时，我们分别挑选了3款其他公司的特色C18柱，以及CP系列通用型C18 MGII和强极性C18 AQ，与CP ADME-HR进行对比试验。

【色谱条件】

色谱柱：5 µm; 4.6 mmi.d. x 150 mm

流动相：10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH

= 95 / 5

流速：1.0 mL/min

温度：40 ℃

检测器：UV 254 nm

进样量：1 µL

通过实验结果计算所得的选择因子如下表所示。

可以看出，ADME在对极性基团（羟基）的选择性上明显优于C18柱。此外，ADME在非对映异构体的分离上也展现出了更好的构型选择性。

如果C18柱的分离不足，请尝试ADME色谱柱不同的选择性。

# 01 核酸碱基的分析

我们使用C18、C8、Ph和ADME四种不同键合相的色谱柱对胞嘧啶（1）、尿嘧啶（2）、鸟嘌呤（3）、胸腺嘧啶（4）和腺嘌呤（5）进行分析。通过实验数据不难看出，ADME展现出了良好的分离能力和保留能力，鸟嘌呤和腺嘌呤的选择因子达到4.05。

【色谱条件】

色谱柱：5 µm; 4.6 mmi.d. x 150 mm

流动相：10 mmol/L HCOONH4 / CH3OH

= 90 / 10

流速：1.0 mL/min

温度：40 ℃

检测器：UV 254 nm

进样量：5 µL

# 02 ATP相关物质的分析

相较于强极性C18柱CP C18 AQ，CP ADME-HR不仅对于强极性化合物肌苷酸（1）、三磷酸腺苷（2）、二磷酸腺苷（3）、一磷酸腺苷（4）和次黄嘌呤（5）展现出了更好的分离和保留能力，并适当降低了相对极性稍弱的肌苷（6）的保留时间，可获得更好的分析效率。