2026-07-10 11:28:34, 环亚生物 环亚生物科技有限公司
三阴乳腺癌,是一类特殊亚型乳腺癌,其雌激素受体ER、孕激素受体PR和原癌基因HER-2经检测均为阴性表达。由于缺失这三大最重要、最成熟的乳腺癌靶向治疗靶点,针对性靶向治疗方案基本无效,而常规化疗、免疫治疗、抗体药物偶联物等治疗方式,预后很差,故而三阴乳腺癌又被称为乳腺癌之王。
肿瘤电场治疗(Tumor Treating Fields, TTFields)是近年来兴起的一种新型癌症治疗方法,通过应用低强度的交变电场来干扰癌细胞的生长和分裂过程,达到治疗的目的。目前TTFields疗法主要采用单一的“最佳”电场频率来最大限度的杀死靶向细胞,而不影响其他细胞。
然而,由于有丝分裂过程中细胞大小、形状和倍数的差异,细胞对TTFields的适应调节等因素,这种理想的最佳电场频率可能并不存在。在研究调频(frequency-modulated,FM)肿瘤电场治疗对三阴性乳腺癌症细胞的疗效时,细胞粒径大小和活率的变化是反映细胞凋亡情况的重要指标。
因此,精准的统计出样本细胞的数量、活率以及粒径大小对于该研究至关重要。
来自克莱姆森大学的Austin R. Smothers等人通过调节电场频率,来研究调频(frequency-modulated,FM)肿瘤电场治疗对三阴性乳腺癌细胞的疗效,并与人乳腺上皮细胞做对比,相关研究成果以“Optimization of tumor-treating field therapy for triple-negative breast cancer cells in vitro via frequency modulation”为题,于2023年6月发表于《Cancer Cell International》。
本研究中,单独培养和共培养人乳腺癌细胞(TNBC)MDA-MB-231和人乳腺上皮细胞MCF-12,分别接受非调频(unmodulated,UM)TTFields和FMTTFields(150kHz,调频范围±10 kHz)的作用,同时设置不做任何处理的阴性对照和400µM顺铂处理的阳性对照。在作用24h,48h和72h后,采用Moxi Go II库尔特流式细胞计数仪分别检测各组细胞凋亡情况。
在UMTTFields和FMTTFields处理24h后,TNBC表现出明显的细胞粒径减少(图1a,细胞早期凋亡的一个明显标志)和细胞活率降低(图1b),FMTTFields处理下的TNBC 细胞凋亡率明显升高(图1c)。而上皮细胞受影响相对较小。72h后,在FMTTFields作用下,TNBC基本全部死亡,而乳腺上皮细胞基本无影响。共培养的细胞,在UMTTFields和FMTTFields作用24h后,其结果与单独培养的细胞结果相类似(图3)。
该文章显示,FM-TTFields可有效抑制TNBC的生长,同时对上皮细胞几乎无影响。FM-TTFields通过调频来解决异质性的肿瘤细胞,同时还防止细胞对治疗脱敏。本文仅对FM-TTFields进行了初步探讨,还有很多工作,比如其对于不同细胞系的作用,对于3D培养细胞的作用,以及TTFields其他参数的调节优化等等,都需要深入研究。
Precision cell systems公司的Moxi系列库尔特细胞计数仪及流式细胞仪,依托微流控库尔特电阻抗技术,突破传统光学检测的瓶颈,以高精度、高重复性、极速检测、极简操作、后期无需常规清洁维护的核心优势,实现了细胞计数技术的全面升级。
采用库尔特电阻抗原理,结合微流控芯片技术,对细胞进行精确计数和粒径测量。
基于细胞/颗粒与缓冲液的电学特性差异
在恒定电流电路中,悬浮在缓冲液中的细胞通过检测孔
细胞取代检测孔内相同体积的缓冲液
孔内外两电极之间电阻发生瞬时变化
引起电位脉冲,脉冲信号的幅值与细胞体积成正比,脉冲出现次数与细胞数量对应。
通过电阻抗检测,精准测量细胞数量(细胞/细胞核/PBMC 外周血单个核细胞)
通过电阻抗方式,三维精准测量细胞/颗粒的粒径
速度快、统计可靠,数秒内完成上千上万个细胞的细胞计数和粒径测量
采用488nm激光光源,结合两个PMT通道,525/45nm通道和561nm/LP(或者646nm/LP,可根据需要更换),实现流式分析
无标记细胞健康评估
开机即用,10秒出测试结果,使用后无需清洁维护
应用于精准细胞计数、健康评估、单细胞测序文库质控、 CAR-T 细胞治疗质控、凋亡/转染检测、活性氧簇、线粒体膜电位等常规流式细胞分析等
成像类计数误差
Moxi库尔特计数误差
库尔特技术的细胞计数更加精准,误差更小
成像类直方图
Moxi库尔特直方图
库尔特技术的细胞体积测量更加精准,误差更小
可以区分不同粒径大小的细胞和碎片
&可以分析更小粒径库尔特技术的细胞计数的误差更小更加精准,
细胞活率测量的误差更小
Moxi 系列 PMT 光学检测器性能优势对比
库尔特流式技术Moxi V / Moxi Go II | 明场成像 | 二极管/PMT | |
检测器 | 二极管/PMT | CCD/CMOS | 二极管/PMT优势 |
技术原理 | 是灵敏度极高,响应速度非常快的单点光探测器。可以把入射的光子转换成电子后,进行倍增放大,在阳极上产生放大的电流信号 | 电荷耦合器。使用高感光度的半导体材料制成,把照射到CCD上的光子转换成电,再通过模数转换器,转换成数字信号 | |
主要应用 | 主要用于光学成像等应用 | 多用于荧光检测,弱光检测等 | |
灵敏度 | 极高 | 较高 | PMT检测下限更低,能够识别弱光信号 |
线性动态范围 | 106 | 104 | PMT检测范围的上下限更宽,定量更准确 |
光学波段范围 | 某一具体波段 | 全光谱 | PMT受非目标波长光线影响弱 |
信噪比 | 高 | 低 | PMT背景噪音更低 |
温度影响 | 小 | 大 | 常温使用时,PMT具有更低的背景噪音 |
应用优势 | 荧光检测的活率测量更精准 |
库尔特电阻抗法与显微成像法对比
对比 | 库尔特电阻抗法 | 显微成像法 |
检测原理 | 电阻抗检测 | 光学成像,软件识别,算法估算 |
计数准确度CV(%) | ≤5%,精准计数 | 10-40%,误差较大 |
粒径测量 | 采用电阻抗方式测量,3D检测测量精准度更高 | 根据细胞图像通过算法判断,精度较差 |
计数体系(µl) | 38.5 µl,统计学准确度高 | <10 µl(多为0.5 µl) |
计数数量 | 120-40,000 | 3-400(仅视野内细胞) |
检出浓度最低 | 3×103,适合低浓度细胞样本和珍贵细胞样本 | 104 |
计数速度 | 极快(8秒内) | 较慢(10–30 秒,受图像处理算法影响) |
精度与重复性 | 极高(国际公认细胞计数及粒径测量金标准) | 较差(依赖图像质量与算法) |
直方图分辨率 | 1000-1200 bins | 40 bins |
抗干扰能力 | 较强 | 易受细胞聚团、堆叠、分布不均影响 |
细胞活率测量 | 更加灵敏,更加精准 | |
细胞分析 | 单个细胞独立分析 (流式) | 群体成像 |
样本适应性 | 较高,不受培养基以及细胞颜色,折光率影响 | 较差,会受细胞透明度影响,对未染色的透明细胞适配度较差 |
细胞治疗、生物制药、生物检测
CAR-T/TCR-T 细胞治疗产品
干细胞制剂
AAV腺相关病毒/慢病毒载体生产
重组蛋白药物/抗体生产
疫苗生产(细胞基质疫苗)
单细胞测序,单细胞组学
循环血肿瘤CTC检测
肿瘤免疫与精准诊疗
肿瘤免疫治疗监测
液体活检 / 早期诊断(CTC,PBMCs)
肿瘤疫苗研发
抗肿瘤药物研发 / 免疫毒性
感染、炎症、细胞免疫和疫苗
新冠 / 流感 / 艾滋病(HIV)
疫苗开发 / 免疫原性评价
自身免疫病:类风湿,系统性红斑狼疮
单细胞、稀有细胞研究
单细胞测序,单细胞研究
细胞核计数
低浓度样本计数(支气管肺泡灌洗液,泪液,脑脊液、胸腹水,循环血肿瘤细胞等)
干细胞和再生医学
胚胎干细胞,肿瘤干细胞
成体干细胞,祖细胞
再生医学研究
细胞体积测量
细胞病理研究
细胞周期研究
发育生物学研究
特殊细胞和微生物计数
精子细胞
鞭毛虫:贾第鞭毛虫,领鞭毛虫,阿米巴滋养体
藻类: Algae,颗石藻,甲藻,莱茵衣藻
真菌:酵母菌
材料、交叉学科
细胞内药物递送
纳米材料,血管支架
石墨烯量子点,磁珠
微流控(细胞培养)
生物传感器(细胞毒性)
环亚生物科技有限公司(APG BIO Ltd)成立于2011年,专注于引进国外创新技术和高品质仪器设备。
全自动DNA核酸脉冲场电泳回收仪--美国Sage Science
代替手工切胶和磁珠,用于二代/三代/超长测序文库、常规分子实验的精准回收
E-Peak 全自动核酸蛋白分析系统--融萦
毛细管原理,全自动、高通量、高灵敏度、高分辨率,对核酸蛋白分离检测和质控
实时追踪加样,避免加样错误,兼容384/96孔板、排管,兼容单/8/12通道移液枪
6/24孔板分组对比实验,用于细胞、类器官的生长监测、划痕迁移、培养优化等
超高通量、高密度微阵列生物芯片点样仪 --英国ArrayJet
单次可喷点上万种生物样品,制备最多1000张高密度生物芯片,用于高通量筛选
皮升、纳升级高精度微阵列生物芯片点样仪--德国M2 Automation
生物传感器、微流控、微孔板、微柱、微针、覆膜、POCT芯片等点样,可灵活定制
超高通量 SPRi分子互作仪--美国Plexera
表面等离子共振成像技术,无标记实时动力学检测,最多同时检测3840对分子互作
E-Pro4 全自动蛋白质免染成像分析仪--融萦
电泳成像一体,用于蛋白、多肽的定性定量、表达分析和纯度检测等
超高精度组织 原位蛋白功能定量分析系统--西班牙Hawk Biosystems
小于10nm距离的蛋白质相互作用定量验证,用于互作、翻译后修饰、肿瘤免疫等
毛细管电泳生物制药分析系统--荷兰Prince technologies
纳升级全自动压力浓缩进样,全程控温,用于蛋白纯度/等电点测定、制药质控等
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