三乙胺作为流动相添加剂,还有什么用途?

2025-12-08 10:33:59, 色谱闲云 月旭科技


液相方法开发,流动相的选择是非常灵活多变的,在前期文章中笔者已经从整体上对流动相的选择进行了概述。三乙胺是大家非常熟悉的一种添加剂,本文将围绕它的一些特殊作用来聊聊。

一、扫尾剂


这是大家最为熟知的一类作用,约70%的药物为碱性化合物,在前些年开发方法时,大家都会习惯性的加入一些三乙胺来屏蔽色谱柱填料硅羟基的次级作用,以解决目标化合物的拖尾问题,当然前期文章我们也学到了可用离液剂来替代更加方便,这里不再赘述。

例:《中国药典》盐酸特比萘芬有关物质方法流动相,以三乙胺缓冲液(取0.2%三乙胺溶液,用冰醋酸调节pH值至7.5)-甲醇-乙腈(30∶42∶28)为流动相A,以三乙胺缓冲液-甲醇-乙腈(5∶57∶38)为流动相B。

此外,在异构体正相体系分析碱性化合物时,也需要加入三乙胺或者二乙胺来改善峰形(通常来说二乙胺的效果要优于三乙胺,这是因为二乙胺pKb略小于三乙胺,因此碱性相对较强,目标化合物中含有一级胺、二级胺时碱性强于三乙胺,竞争性就会变强,所以正相体系首选添加剂为二乙胺)。

例:酒石酸布托啡诺手性异构体流动相,正己烷-乙醇-二乙胺(70:30:0.1)。

二、离子对试剂


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常规离子对试剂(会改性色谱柱)

在遇到一些极性较大难以保留的酸性化合物时,常常会加入一些离子对试剂以提供离子交换作用来使目标物保留,如四丁基氢氧化铵、四丁基硫酸氢铵(仅为盐型区别,起作用的为四丁基胺)。

此外近些年还有一些新型的离子对试剂如戊胺、N,N-二甲基辛胺等也可起到同样的作用,相对于四丁基胺来说对色谱柱更加友好一些,不过这些长链烷基胺均会改性色谱柱,只能专柱专用。烷基磺酸类的离子对试剂属于有机酸类,主要用于保留碱性物质,与有机碱相反。

例:《中国药典》头孢克肟有关物质方法流动相,以四丁基氢氧化铵溶液(取10%四丁基氢氧化铵溶液25 mL,加水1000 mL,摇匀,用1.5 mol/L磷酸溶液调节pH值至7.0)-乙腈(72∶28)为流动相

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特殊离子对试剂(不改性色谱柱)

三乙胺除了作为扫尾剂,也有一定的离子交换作用,与乙酸形成独特的乙酸-三乙胺体系,简称TEAA。通常用在寡核苷酸的样品分析中,寡核苷酸由于极性大,常规反相体系保留差,但使用TEAA却可以在反相条件得以保留,彰显了该组合的特殊之处。以此类推,该体系还可以应用于带多个酸性基团的大极性的小分子,也可以取得意想不到的效果。

例:寡核苷酸药物Mipomersen有关物质流动相,流动相A:0.1 mol/L三乙胺乙酸盐溶液(pH 7.0),流动相B:乙腈-0.1 mol/L三乙胺乙酸盐溶液(pH7.0)(80:20)。

此外,也有资料表明TEAA在手性拆分中也有一定的应用

三、构建空间选择体系


一些非对映异构体、构造异构体由于结构相似通常较难分离,这时可以在流动相中加入三乙胺,可能会取得惊喜的效果。对的,又是三乙胺,为什么三乙胺还有这样的作用呢?三乙胺在C18柱中与Si-OH结合来屏蔽其次级效应,但其三个“小尾巴”(乙基)伸向外面,乙基属于疏水基团,与周围的C18链共同构建了一个“稳定”的空间,这样就具有了一定的空间选择性,所以遇到这类问题时,可以尝试一下。

这么看来,三乙胺真是方法开发中的“臭宝”,虽然臭但是浑身都是宝,学会合理利用其特性,能解决不少疑难杂症哦!

作者:色谱闲云(月旭公众号签约撰稿人)

排版:吴贝尔

审核:肖留榜

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