什么时候流动相可以使用丙酮？

什么时候流动相可以用到丙酮？先来看一个应用实例。

在现行国标《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》中，流动相就使用了丙酮；而后续发布的推荐性国标《GB/T 29663-2013 化妆品中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的测定 高效液相色谱法》中，同样采用丙酮作为流动相有机相。

为什么平时很少使用丙酮作为反相流动相的有机相？主要原因是甲醇和乙腈已经能够满足大部分洗脱分离需求。

洗脱分离的本质是通过调节流动相比例来改变流动相极性。而甲醇和乙腈作为有机相，与水任意比例互溶时，其极性变化范围已足以覆盖大多数化合物的分离需求，因此使用丙酮就显得没有那么必要。

使用丙酮作为流动相时，应满足以下条件：

1）丙酮比例不宜过高

丙酮极性较低，洗脱能力比乙腈更强。如果待测化合物为极性较大或中等极性，使用丙酮作为有机相时，往往难以实现良好分离，因为它们会在短时间内被冲出色谱柱。

2）检测波长应高于330 nm

丙酮的紫外截止波长约为330 nm。当检测波长低于该数值时，会产生强烈背景吸收，导致：

▪ 基线升高

▪ 噪音增大

▪ 目标峰被掩盖

3）注意对色谱柱及仪器的影响

高比例或长期使用丙酮可能：

▪ 破坏固定相化学键

▪ 导致固定相流失

▪ 缩短色谱柱寿命

▪ 泵密封垫、比例阀等部件中的聚合物材料发生溶胀或损害

因此，使用丙酮作为流动相时，除控制比例外，使用后应以甲醇冲洗色谱柱及系统，清除残留。

我们再来看苏丹红物质的检测，为什么要使用丙酮作为流动相？这是非常有必要的。

苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为极低极性化合物，当流动相中水相比例过大时可能析出；同时在常规C18色谱柱上保留极强，不使用低极性有机相难以洗脱。

另外，即使采用高比例甲醇或乙腈调节流动相，也难以体现足够的极性差异，无法实现有效梯度洗脱。最终往往出现混合标准品色谱图良好，而实际样品中目标物与杂质难以分离的情况。

此外，苏丹红的最大吸收波长在450 nm以上，也符合丙酮的使用条件。

综上所述，丙酮作为流动相有机相，不但使用条件较为苛刻，在很多情况下也并非必要。

如果大家有其他使用丙酮作为流动相的分析方法，或对其应用有不同看法，欢迎留言讨论，互相学习。