为什么色谱出峰时间会漂移？

我们在使用液相色谱的时候是否遇到过这样的问题：色谱图一直都是好好的，但是不知道为什么，突然有一天目标化合物的出峰时间开始漂移了，不但漂移，而且会随着时间推移，不断往前或往后移，导致没法根据出峰时间来对样品进行定性。今天作者打算从几个方面和大家讨论这个问题。

流动相组成的变化是导致出峰时间漂移的常见原因。包括：如果溶剂瓶密封性不好，随着时间的推移，流动相中的有机相（如乙腈、甲醇）比水相挥发得更快，这就会导致有机相比例下降，使流动相极性发生改变。同样，流动相pH和缓冲盐浓度的变化也会使出峰时间受到影响。如甲酸、氨水等成分的挥发；还有碱性缓冲流动相对空气中的二氧化碳进行吸收，都会导致pH改变；另外缓冲盐的析出对盐浓度比较敏感的物质也会有较大的影响。下面这些场景会引发此类情况:

通常出峰时间与温度是密切相关的，如果柱温箱温度不稳定甚至没有使用柱温箱，会很容易导致出峰时间漂移；另一方面，如果使用过极端pH的流动相，色谱柱的固定相结构有可能会发生改变，导致柱效严重降低；同时，分析方法中，设置的梯度洗脱程序不合理，没有在返回初始梯度后有充足的时间使色谱柱平衡，也会导致出峰时间的漂移。

别看样品进样液只有10~20 μL左右，如果突然改变样品溶剂的话，哪怕是甲醇换成乙腈，那么都有可能令出峰时间发生变化。因为如果样品溶剂的极性小于初始流动相，那么就有可能出现溶剂效应，导致峰形和出峰时间变化，建议尽量使用与初始流动相组成相同或极性更强的溶剂来定容样品。

通过上述几点的排查，相信大部分的漂移情况都能得到识别和解决，对流动相勤更换以及对色谱柱和仪器的维护，是保证出峰时间稳定的关键。如果读者有其他原因及解决办法的解读，欢迎分享讨论。