动物组织中盐酸克伦特罗的测定

2022-11-16 17:58:50 月旭科技（上海）股份有限公司

一、适用范围

本标准规定了测定动物组织中盐酸克伦特罗的气相色谱-质谱法（GC-MS）（本实验样品为鸡肝）。

参考标准《NY/T 468-2006 动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法》

二、提取步骤

准确称取5g试样（精确至0.01g）于50 mL离心管中，加入15mL乙酸乙酯，再加入3mL 10%碳酸钠溶液，加入匀质子涡旋混匀2min，以5000r/min离心3min，吸取上层有机溶剂于50 mL离心管中，在残渣中再次加入10mL乙酸乙酯涡旋混匀1min，以5000r/min离心3min，吸取有机溶剂合并提取液。在提取液中加入5mL 0.1mol/L的盐酸溶液，涡旋混匀30s, 以5000r/min离心3min，吸取下层萃取液，重复同样步骤萃取一次，合并两次萃取液，用2.5mol/L氢氧化钠调节pH至5.2（±0.2）。

三、净化步骤

SPE柱：月旭Welchrom® P-SCX小柱，规格：500mg/6mL;

活化：5mL甲醇，5mL水，5mL 30mmol/L盐酸；

上样：将萃取液全部上样，弃去；

淋洗：5mL水，5mL甲醇，弃去并压干；

洗脱：5mL 4%氨水甲醇，收集并压干。

四、衍生

将洗脱液于50℃下氮吹至干，在衍生瓶中加入甲苯100μL，双三甲基硅烷三氟乙酸胺（BSTFA）100μL，充分涡旋混匀后，置80℃烘箱中，反应1h。冷却至室温后加入300μL甲苯，混匀，转入进样小瓶，上机测定。

五、色谱条件

- 气相色谱条件

色谱柱：WM-5MS, 30m×0.25mm×0.25μm；

进样口温度：220℃；

升温程序：70℃，保持0.6min，以25℃/min升温至200℃，保持6min，以25℃/min升温至280℃，保持5min；

载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

进样方式：不分流进样；

恒流模式：0.9mL/min；

进样量：1μL。

- 质谱条件

电离方式：电子轰击电离源（EI）；

电离能量：70eV；

传输线温度：280℃；

离子源温度：230℃；

四极杆温度：150℃；

监测方式：克伦特罗：86/212/262/277；

溶剂延迟：8min；

# 六、色谱图或者加标回收率结果

图1. 盐酸克伦特罗0.05μg/mL图谱

表1、出峰情况

物质	保留时间	类型	峰宽	面积	开始时间	结束时间
克伦特罗	12.673	M	0.043	18922	12.62	12.772

图2. 鸡肝样品图谱

图3. 鸡肝样品加标0.005mg/kg图谱

表2、加标回收率表

物质	加标水平	平均回收率	RSD值（n=2）
克伦特罗	0.005mg/kg	95.57%	2.74%

# 七、相关产品信息

货号	名称	规格
00523-20006	SPE小柱	Welchrom® P-SCX,500mg/6mL,30pk
00824-31001	固相萃取装置	Welch 固相萃取装置， 12位方缸
00821-32291	盖子+垫片	Welchrom® 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔6mm 100pk
00821-40927	样品瓶	Welchrom® 2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处 11.6*32mm 一级水解玻璃 100pk
03904-22001	气相色谱柱	WM-5MS , 30m×0.25mm×0.25μm
00837-05006	50mL螺口尖底离心管	Welchrom® 离心管一次性离心管，平盖，锥形底,RCF12000xg,袋装, 未灭菌，50mL，50/包
00826-C337P025	盐酸克伦特罗标准品	A2S, CAS No.:21898-19-1,25mg