2024-03-14 10:30:26 技尔(上海)商贸有限公司
在目标物保留策略中
通常包含5个处理步骤
1—小柱活化
一般使用高比例有机试剂来去除小柱中的本底杂质,也顺带活化填料官能团。
2—平衡
一般使用样品溶剂来平衡,为后续上样提供合适的保留环境。
3—上样
将样品载入小柱。目标物及部分杂质保留在小柱内。
4—淋洗
使用一定的溶剂淋洗杂质,抛弃流出液。反相中常使用高水相淋洗极性杂质。
5—洗脱
使用一定溶剂回收保留在小柱内的目标物,收集流出液
【点击可查看大图】
在通过净化策略中,样品经过SPE柱,杂质被填料保留,目标物被流出收集,此模式也称之为除杂模式,常见于以正相材料为填料的情况。
固相萃取柱的
3种主要作用机理
1.非极性作用力
对于键合硅胶及聚合物(如SDB)吸附剂而言,非极性作用力产生于官能团上的碳氢键与目标物的碳氢键之间,也称之为范德华力。常见的非极性固相如C18、C8、CH、PH等,就直链烷烃官能团而言,其非极性作用力随着碳链的缩短而降低。此类SPE柱具有较好的通用性,但选择性可能比较差。
反相固相萃取常应用于目标物保留策略,如InertSep HLB处理鱼肉中四环素案例,所用溶剂有机相越高,非极性越强,则洗脱能力越强。若回收液中仍有部分杂质,可尝试增大淋洗体积,若回收率偏低可尝试减弱淋洗液强度或增强洗脱液强度。
2.极性作用力
极性作用力发生在填料极性表面与目标化合物的极性官能团之间,也称为正相萃取。极性作用力包括氢键、偶极-偶极相互作用、诱导力、π-π相互作用等。常见的正相固相包括:硅胶、氧化铝、弗罗里硅土、石墨化碳及含有氰基(CN)、氨基(NH₂)、二醇基(2OH)的键合硅胶。
正相固相萃取常应用于通过净化策略,如InertSep S GC-e/NH2处理食品中的非极性农残,样品中色素、有机酸、糖类等杂质则被保留在小柱内,需注意的是在使用含有石墨化碳小柱时在活化及洗脱阶段加入甲苯来提高苯环类的农残回收率。正相萃取洗脱液一般选择乙腈、异丙醇、二氯甲烷、正己烷等。所用溶剂极性越强,则洗脱能力越强。若回收液中仍有部分杂质,可尝试减弱上样液或洗脱液强度,若回收率偏低可尝试增强洗脱液强度。
3.离子作用力
离子作用力发生在带相反电荷的目标化合物与固相官能团之间。一般当目标物是强离子时选择弱离子交换柱,当目标物是弱离子时选择强离子交换柱。此模式需了解填料及目标物的带电状态,即了解各自pKa,保留时两者为相反电荷状态,洗脱时其中一个或两者均不带电。对样品而言,一般调整环境pH与样品pKa差值2以上来调节分子离子状态。离子交换是一个定量的化学反应过程,选择性高,但需要考虑该离子交换剂的当量容量,单位一般为meq/g。
下图展示了几种聚合物反相+离子交换小柱的常规使用流程;
以导入强阳离子交换基团苯磺酸的WondaSep MCX处理食品中兽残环丙氨嗪为例阐述操作要点:苯磺酸为强酸,在淋洗阶段调整为酸性环境(pH小于目标物pKa两个单位以上),使碱性环丙氨嗪为离子态并与苯磺酸官能团结合保留在小柱内;洗脱使用高比例有机、氨水的碱性环境(pH大于目标物pKa两个单位以上),使环丙氨嗪处在分子态而得以洗脱。
表:常见固相萃取小柱类型
【点击可查看大图】
相关视频
仪器咨询
技尔(上海)商贸有限公司是由日本色谱耗材、分析仪器生产厂商GL Sciences在中国设立的全资子公司。我们秉承“以用户需求为先”的理念,将GL Sciences在色谱行业积累的经验与不断发展的进步科技相结合,为中国色谱行业用户提供解决方案与优质服务,让您的色谱分析工作更便捷、更高效。
GL Sciences扎根分析领域五十余年,旗下产品覆盖环境、医药、材料、食品、化工、生命科学等多个领域,可为客户提供分析中所需的各类仪器及耗材。
@
~阅读原文 解锁更多精彩内容~
03-13 Marcel Burger等
媒体报道 | 亦庄融媒采访卓立汉光:如何推动产品迭代促进订单增长?03-13 光电行业都会关注
邀请函 | 卓立汉光亮相2024慕尼黑光博会,3月20日上海见!03-13 光电行业都会关注
解决方案 | 可见近红外光纤光谱仪在透射率应用中的示例03-13 奥谱天成
热点应用 | 复旦大学张凡团队开发具有高亮度和长血液循环时间的近红外二区刷状大分子荧光探针用于肾脏疾病检测03-13
体外诊断试剂量值溯源的实施方案及关键要素(上篇)03-13
国仪量子携手清华磁共振实验室为您答疑解惑!顺磁小课堂第42期03-13 CIQTEK
深入断裂“现场”!扫描电镜在金属断口分析中的应用03-13 CIQTEK
热辣滚烫!诺力昂庆祝国际妇女节03-13 Nouryon
干货!补血良药“当归”的农药残留检测03-13 得泰仪器Detelogy
酶标仪怎么选?看这篇就够了03-13 安捷伦科技
精细分型 伴您前行——免疫精细分型11项03-13 安捷伦细胞分析
一个视频带您了解安捷伦Seahorse XF 技术03-13
肿瘤代谢系列讲座 | 肿瘤代谢与免疫专场03-13 安捷伦细胞分析
售后直播间 | Trouble Shooting 之酶标仪与液体处理03-13 安捷伦细胞分析
在线讲座 | 安捷伦细胞能量代谢分析在药物研究中的应用03-13 安捷伦细胞分析
天美生命科学 —— 校园实验室品牌宣传合作人邀约03-13 天美生化
展会邀请 | 鉴知技术邀您共赴慕尼黑上海光博会03-13 鉴知技术
点成活动 | 新品独家亮相!3月16日CACLP展会,点成邀您畅游科技盛宴!03-13 生物工程师
展会预告|第九届全国储能科学与技术大会03-13