2024-03-14 10:07:43, 安捷伦细胞分析 安捷伦细胞分析事业部(BioTek)
流式细胞术淋巴细胞亚群精细分型检测在多种疾病的预防、诊断、治疗及预后判断中具有重要作用。
其中,精细分型11项用较少的CD分子,可检测项目除了包含传统淋亚,还包含了T细胞的纯真,记忆,活化的检测,项目简洁实用,使其成为在各级医院普及率较高的一项流式检测。接下来让我们一起来看一下它在各个科室的应用吧。
SUMMARY 2024
感染科
在急性病毒感染或接种疫苗期间,初始T细胞被激活并在1~2周分化成为效应T细胞。这种分化伴随着强大的增殖、转录、表观遗传学和代谢通路的改变;同时效应T细胞基本特征的获得,如效应功能、组织归巢改变,而外周血中明显的T细胞数目增殖(尤其是CD8+T细胞)、T细胞表面高表达各种信号分子促使细胞进入增殖周期,发挥效应功能;在效应T细胞扩增达到峰值、炎症消退和抗原清除后,大多数活化的T细胞死亡,但仍有极少数的细胞持续存在并进入到记忆T细胞池,成为特异性记忆T细胞,这些记忆T细胞保持了再刺激后快速重新激活效应功能的能力。而初始细胞池和记忆细胞池的细胞在经历急性的扰动后,随着效应T细胞的扩增消除后,两者的比例又恢复到正常的范围内。
相比之下,在慢性病毒感染时(涉及持续的抗原暴露以及炎症),经过初次感染后(病毒类型不同而引起免疫应答的程度不同),持续性病毒产物的存在是慢性病毒感染的一个共同特征,会导致宿主免疫系统发生剧烈而持续的变化。机体为应对持续的抗原刺激,会出现低水平的细胞激活、循环的特异性CD8+T细胞数量保持在较高水平,并伴有其他免疫功能的异常,如黏膜免疫屏障破坏、炎症因子的持续升高及代谢异常等的改变。由于间歇性产生的病毒抗原可防止病毒特异性T细胞收缩,导致体内特异性CD8+ T细 胞逐渐累积形成记忆细胞膨胀现象,这种现象有可能会导致体内对未遭遇的抗原/病毒的免疫功能下降,以及对继发感染、癌症和炎症性疾病的易感性改变[1]。
在COVID患者中,CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞和B细胞的绝对数量都随着疾病严重程度的增加而逐渐减少,并且这些细胞在极重度患者中都显著低于轻度患者。极重度患者的B细胞数量也显著低于重症患者。与轻度患者相比,重症和极重度患者CD4+和CD8+T细胞上激活标志物HLA-DR的表达显著增加,尤其是极重度患者的CD4+T细胞表达增加。CD4+和CD8+T细胞上表达的共刺激分子CD28在重症和极重症患者中减少。极重度患者CD4+T细胞上CD28的表达显著低于重症患者。此外,与轻度患者相比,极重度患者CD4+和CD8+T细胞上PD-1的表达显著增加[2].在一些研究中,COVID-19患者进展为重度和危重症与单核细胞表面HLA-DR分子表达减少有关,mHLA-DR的最低表达与ICU的死亡率有关,尽管长期ICU患者的低mHLA-DR与死亡率之间的关系还有待进一步评估.[3]
HIV感染后造成的免疫损伤主要包括:CD4+T细胞数量减少、功能障碍及异常免疫激活;
功能障碍:CD28表达下降是CD4+T细胞功能障碍的重要表现之一,CD4+T细胞数量越低,功能障碍越严重。已有研究表明低水平的CD4+CD28+T细胞可以作为HIV感染者高死亡率的一个独立预测指标;
异常免疫激活:HIV感染后,病毒抗原的持续刺激使机体免疫系统处于异常增高的激活状态,CD8+ T细胞激活亚群比例显著升高,而且CD4+T细胞数越低,病毒载量越高,CD38表达比例越高。鉴于CD38表达与病毒载量之间的相关性,可以用细胞激活亚群比例来间接评估病毒复制的活跃程度,进而判断抗病毒治疗的疗效;
分化:HIV感染,常伴随着初始T细胞和记忆T细胞比例失调,其中CD4+CD45RA+纯真T细胞明显下降。
在评价HIV感染者和AIDS患者的免疫状况时不仅要考虑免疫细胞数量和功能的变化还应考虑免疫细胞的激活水平。
HBV主要分为急性HBV和慢性HBV两种,其中急性自限性HBV感染外周血淋巴细胞亚群的研究有限,部分研究表明,急性HBV感染初期外周血NK细胞显著减少,而同期肝内NK细胞则明显增加,外周血CD3+ CD8+T淋巴细胞总数明显上升,这些改变多与HBV特异性细胞,即毒性T淋巴细胞清除病毒、控制疾病进程有关。另有研究表明,急性HBV感染者CD8+CD38+HLA-DR+T随着病程的严重程度增加。
慢性乙型肝炎患者及慢性HBV携带者外周血CD4+T淋巴细胞及CD8+T淋巴细胞计数均降低,慢性乙型肝炎患者外周血CD8+CD38+T细胞比例显著升高,而慢性HBV携带者CD8+CD38+T细胞比例较正常对照组并无明显升高,表明HBV携带者相对处于免疫耐受和静止的状态。另有研究表明慢性乙肝患者CD4+CD45RA+CD62L+初始T细胞比例及计数均减少,记忆/效应T细胞比例增加。在使用阿德福韦酯良好控制HBV的患者中,外周血中CD8+CD38+T细胞的比例和绝对计数均显著下降。
张杰云等研究发现活动性结核患者治疗前外周血CD3+ 、CD3+ CD4+ 、 CD3+ CD8+ T细胞绝对计数均明显低于健康者及潜伏感染者,健康者与潜伏感染者比较无差异。CD19+B细胞绝对计数与健康者及潜伏感染者比较明显减低,动态监测结核患者抗结核治疗前、治疗3个月、治疗6个月后外周血B细胞的变化,发现结核患者治疗6个月后CD19+B细胞百分比较治疗3月后明显增加。[4]
SARS患者外周血淋巴细胞亚群表现为可逆的一过性快速减少并恢复。谢静等研究发现,与正常对照组相比发病第1周SARS患者的CD4+T细胞、CD8+T细胞、纯真及CD4+T细胞均显著降低,第2周持续降低随后快速增高。在发病2~3个月时SARS患者的CD8+T细胞数与正常对照相比已无显著性差异,其中纯真及记忆CD4+T细胞数也快速增加,随访至 1年时记忆CD4+T细胞恢复至正常水平, 但SARS患者的CD4+T细胞及纯真CD4+T 细胞数仍低于正常对照组。[4]
免疫功能正常的人初次感染EBV多为无症状或急性感染 ,最常见表现为传染性单核细胞增多症 (IM),大多预后良好。部分感染者急性EBV相关症状持续存在或反复出现 ,并伴有EBV抗体滴度异常改变,成为慢性活动性EBV感染 (CAEBV)。急性感染期常表现为淋巴细胞计数升高,以CD8+ T细胞的异常增加为主,而B细胞和NK细胞计数降低,CD8+ T细胞比例和计数升高幅度分别是健康对照组的3倍和10倍;CD8+T细胞的HLA-DR和CD38表达比例均达到90%以上,同时第2信号受体CD28表达比例显著下调,提示增加的CD8+T细胞以激活状态处于分化晚期的效应细胞为主[5]。EBV感染者,CD28+表达百分比降低,CD8+活化增加;CD4和CD8幼稚T细胞降低,记忆T细胞亚群水平升高。[6]
我们主要分享了在感染科免疫精细分型11项的应用,下一篇我们将重点介绍在肿瘤及风湿免疫科的应用,希望可以帮助老师提供一些辅助诊疗的思路。
此文仅供科普,对患者的临床诊治应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况综合考虑。
参考文献
03-19
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