2023-11-17 21:31:44, 天美色谱 天美仪拓实验室设备(上海)有限公司
前言
微囊藻毒素(Microcystin,MC)是一类具有生物活性的环状七肽化合物,为分布最广泛的肝毒素。主要由淡水藻类铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)产生,具有相当的稳定性。它能够强烈抑制蛋白磷酸酶的活性,还是强烈的肝脏肿瘤促进剂。随着中国水体的富营养化程度逐渐加剧,蓝藻水华和赤潮的发生逐渐增加。80% 的蓝藻水华都可以检测出次生代谢产物---微囊藻毒素,它对水体环境和人群健康的危害已成为全球关注的重大环境问题之一。为了保障公众健康,我们需要加强监测和控制微囊藻毒素的存在。参照GB/T 5750.8-16.1,本应用采用赛里安LC6000 UHPLC系统,搭配SCION ODS-AQ C18色谱柱和SCION 6430超高灵敏度DAD检测器,实现对微藻囊毒素的高灵敏度检测。
实验部分
仪器
001
采用包含以下模块的赛里安LC6000超高效液相色谱仪系统:
• 集成六通道真空脱气的赛里安 LC6100四元泵
• 赛里安 LC6210 高精度、低残留自动进样器
• 赛里安LC6320 立式柱温箱
• 赛里安 LC6430 DAD 超高灵敏度二极管阵列检测器
液相色谱条件
002
▼ 表1 方法参数
试剂及标准品
乙腈(HPLC级),微囊藻毒素RR、微囊藻毒素LR。
结果
示例图谱
001
微囊藻毒素RR、微囊藻毒素LR分离度好,出峰尖锐,详见图1。
▲ 图1 0.5μg/mL微囊藻毒素示例色谱图
标准曲线
002
将微囊藻毒素LR与微囊藻毒素RR标准溶液依次稀释为0.3、0.5、1.0、2.0、5.0μg/mL使用外标法进行标准定量,以浓度为横坐标、峰面积为纵坐标作外标工作曲线;微囊藻毒素响应值和浓度呈良好的线性关系,所得到的相关系数在0.9996以上,详见图2。
▲ 图2-1 微囊藻毒素LR标准曲线
▲ 图2-2 微囊藻毒素RR标准曲线
重现性
003
取1.0μg/mL的标准品溶液连续进样6针,重复性结果如下所示。
▼ 表2 微囊藻毒素定性定量
结论
由实验结果可以看出,采用赛里安LC6000 UHPLC系统,搭配赛里安 ODS-AQ C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱和DAD检测器,可以实现对微藻囊毒素的检测,灵敏度、稳定性、线性均满足GB/T 5750.8-16.1中的需求。
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