液相色谱流动相溶剂如何选择

（图片来源：包图网）

01

流动相在液相色谱中扮演的角色

目标化合物在液相色谱中的保留取决于该物质与流动相和固定相间的作用强度。流动相是整个液相色谱分离过程中的“血液”，它对组分有亲和力，并参与固定相对组分的竞争，因此流动相的选择直接影响组分的分离度。

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流动相选择原则

1

适用性

用作流动相的溶剂应与固定相不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。

2纯度

流动相所用溶剂应有高纯度，以防流动相中的杂质在色谱柱上积累，致使柱性能下降。

3

检测背景值

譬如使用紫外检测器时，所用流动相在检测波长下应没有吸收或吸收很小；当使用示差检测器时，应选择折射率与样品差别较大的溶剂作为流动相。

4

粘度与沸点

溶剂的粘度和沸点要适当。

使用低粘度溶剂可以减少溶质的传质阻力，有利于提高柱效，但如乙醚等溶剂也不宜使用，因为粘度过低的溶剂容易在色谱柱或检测器内形成气泡，影响分离。而粘度高溶剂会影响溶质的扩散、传质，降低柱效，还会使柱压升高，分离时间延长。

对于制备和纯化样品所用的流动相最好选用沸点较低的溶剂，这样易用蒸馏等方法把溶剂从柱后收集液中去除，有利于样品的纯化。

5

对样品的溶解度

如果流动相对样品的溶解度较差，样品会在色谱柱柱头沉积，导致柱效下降。

6毒性

应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂，减少环境污染和确保实验人员的安全。

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03

常用的流动相

反相色谱是大多数样品分析的首选分离模式，该模式一般比其他液相色谱模式的普适性更好、更方便、更容易获得令人满意的分离效果。在反相色谱中，一般使用非极性/弱极性键合固定相色谱柱，如C18柱、苯基柱等。

流动相的选择通常以水相（包括加入一定量的酸、碱、无机盐缓冲液等）做基础溶剂，再加入一定量的能与水互溶的如甲醇（质子给体）、乙腈（质子受体）、四氢呋喃（偶极溶剂）等极性溶剂，其极性及其K值（分配系数）和分离选择性有显著影响。下表列出一些常用溶剂的极性参数p’。

/ 表 高效液相色谱中常用流动相性质 /

溶剂

UV波长极限

/nm

折射率

沸点/℃

黏度(25℃)

/mPa·S

溶剂极性

参数p‘

溶剂强度参数

异辛烷

197

1.389

99

0.47

0.1

0.01

正己烷

190

1.372

69

0.30

0.1

0.01

苯

278

1.501

81

0.65

2.7

0.32

二氯甲烷

233

1.421

40

0.41

3.1

0.42

四氢呋喃

212

1.405

66

0.46

4.0

0.82

乙酸乙酯

256

1.370

77

0.43

4.4

0.58

氯仿

245

1.443

61

0.53

4.1

0.40

二氧六环

215

1.420

101

1.2

4.8

0.56

丙酮

330

1.356

56

0.3

5.1

0.56

乙醇

210

1.359

78

1.08

4.3

0.88

乙腈

190

1.341

82

0.34

5.8

0.65

甲醇

205

1.326

56

0.54

5.1

0.95

水

＜190

1.333

100

0.89

10.2

很大

正癸烷

200

1.412

174

0.92

0.4

0.04

环己烷

200

1.426

81

1.0

0.2

0.04

二硫化碳

380

1.628

46

0.37

0.3

0.15

四氯化碳

265

1.465

77

0.97

1.6

0.18

二甲苯

290

-1.50

-140

0.62-0.81

2.5

0.26

甲苯

285

1.497

111

0.59

2.4

0.29

氯苯

290

1.525

162

0.80

2.7

0.30

甲乙酮

330

1.379

80

0.4

4.7

0.51

吡啶

305

1.510

115

0.94

5.3

0.71

异丙醇

210

1.377

82

2.3

3.9

0.82

正丙醇

210

1.386

97

2.3

4.0

0.82

04

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Description

Grade

CAS

Packaging

Part NO

乙腈

HPLC

75-08-8

4L/玻璃

00814-01010

甲醇

HPLC

67-56-1

4L/玻璃

00814-01008

乙酸乙酯

HPLC

141-78-6

4L/玻璃

00814-75322

乙醇

HPLC

64-17-5

4L/玻璃

00814-75285

二氯甲烷

HPLC

75-09-2

4L/玻璃

00814-70100

环己烷

HPLC

110-82-7

4L/玻璃

00814-70301

正己烷

HPLC

110-54-3

4L/玻璃

00814-01013

异丙醇

HPLC

67-63-0

4L/玻璃

00814-01026

四氢呋喃

HPLC

109-99-9

4L/玻璃

00814-70516

水

HPLC

7732-18-5

4L/玻璃

00814-71800

作者：裴海洋

排版：赵林

审核：夏微微

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