2023-05-09 19:09:57, 上海应用部 月旭科技(上海)股份有限公司
01 相关术语
1. 预处理(condition):使SPE柱达到萃取的最佳状态,以便吸附目标化合物。(活化 平衡)
2. 洗涤(wash):目的是将干扰目标化合物分析的杂质在洗脱前去除。(淋洗)
要求:最大限度去除杂质,而对目标化合物没有明显损失。
3. 洗脱(eluton):用适当的溶剂将目标化合物从SPE柱上洗脱出来。
溶剂应选择:最大限度地将目标化合物洗脱,共洗脱杂质越少越好。
4. 载样(load):即样品上样。样品载入并通过SPE柱的过程。(上样)
5. 干扰物(interferences):也称杂质。是指对目标化合物的萃取或检测起到负面作用的物质。
02 基本原理
利用固体吸附剂(填料)对于液体样品中的目标化合物和干扰化合物进行有选择地吸附,然后用溶剂洗脱,达到去除干扰或富集目标化合物的目的。
本质:固相吸附剂上官能团与目标化合物的官能团之间的作用力。
项目案例
液相上的分离
01 非极性作用力 ——
反相吸附剂/非极性吸附剂/疏水型吸附剂
固相萃取材料官能团上的碳氢键与目标化合物的碳氢键之间的力——范德华力、色散力。
例:C18(Si-)、C8(Si-)、C4(Si-)、C2(Si-)、PHE(苯基)(Si-)、CH(环己基)(Si-)、石墨炭黑、多孔石墨化碳、PSD等。通常非极性的反相SPE柱比较适用于从极性基质中萃取分离非极性及中等极性的目标物。
02 极性作用力 ——
正相吸附剂/极性吸附剂
固相萃取材料极性表面与样品中目标化合物的极性官能团之间的力——氢键、诱导力、偶极-偶极相互作用、π-π相互作用等。
常见极性官能团:羟基、胺基、巯基、羰基、芳香环以及含氧、氮、硫、磷等杂原子基团。
在极性作用力的固相萃取中,样品的基质多为非极性,目标化合物多含有极性较大的官能团。
例:Si、氧化铝、Diol(二醇基)、NH2(氨基)、CN(氰基)等;
石墨炭黑和多孔石墨化碳也可以用于对极性化合物的萃取。
03 离子作用力 ——
离子交换型吸附剂
发生在带相反电荷的目标物与固相萃取吸附剂官能团之间——静电吸引;
三种作用力中强度最大、选择性最好。
有效萃取的条件:
1)环境的pH必须使目标化合物和吸附剂带相反电荷;
2)环境不能含有高浓度的带有和目标化合物相同电荷的竞争化合物。
例:PSA(Si-)、PRS(Si-)、SAX(Si-)、SCX(Si-)、WCX(Si-)、MCX(PS-DVB-)、MAX(PS-DVB-)、PWAX(PS-DVB-)等。
04 多种作用力 ——
次级相互作用
例:以键合硅胶为吸附剂的固相吸附填料(键合硅胶本身的硅羟基),GCB/PSA、GCB/NH2等。
05 分子识别机理 ——
免疫亲和固相萃取(IASPE)
免疫亲和柱中含有和目标物抗体结合在一起的凝胶,样品中的目标毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过亲和层析柱,在免疫亲和柱内目标物与抗体结合,其他的无关物质不会结合而直接通过免疫亲和柱,之后洗涤免疫亲和柱完全除去没有被结合的其他无关物质。最后加入甲醇将目标物释放,然后注入到分析仪器中进行进一步的检测。
作者:庞庆龄
排版:林哥
审核:邹天骏
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