2023-02-16 14:41:44, 上海应用部 月旭科技(上海)股份有限公司
(图片来源:包图网)
在液相系统分析过程中,有没有遇到过峰前延、色谱峰展宽,分叉等现象?为什么有时候同一个样品减小进样量色谱峰就变的很好看?日常的分析工作中,我们通常将更多精力集中在流动相和仪器方法的选择上,忽视了样品进样溶剂的重要性。如果溶剂选择不当则会产生“溶剂效应”,使我们在定性和定量分析中产生误判,影响分析结果。
什么是溶剂效应
通常情况下对于溶剂效应的理解为:稀释剂溶剂强度大于流动相时造成色谱峰变形的现象。
举例:用纯乙腈溶解样品,注入流动相为乙腈-水(18:82)的反相系统中,会造成峰分叉或拖尾的结果,而采用流动相来溶解样品,峰形又会恢复正常。
用通俗的话来描述,溶剂效应的产生是由于样品溶剂与流动相不匹配引起的。
样品溶剂与流动相的“不匹配”包括:
● 二者的洗脱能力差异。
● 二者的互溶能力差异。
● 样品分子在二者中的溶解性差异。
● 样品分子在二者中分子态和离子态的分布差异。
溶剂效应产生的机理
色谱分析,进样过程可分为三个阶段:
● 第一个阶段是样品到达色谱柱。
● 第二阶段是样品部分进入色谱柱。
● 第三个阶段是样品全部进入色谱柱。
而溶剂效应主要产生于进样过程的第二个阶段,即样品部分进入色谱柱。
而在这一阶段中,溶剂效应的产生机理可以用三个部分来进行阐述:
● 样品刚被注入系统,进入色谱柱后,流动相氛围中的目标物以正常速度被洗脱。因强溶剂洗脱,移动速度快,样品在空间上开始慢慢分裂。
● 在一定时间内,溶剂氛围中的目标物移动始终快一些,前后两部分距离扩大。但移动快的目标物所处氛围逐渐被流动相稀释(注:因为溶剂和流动相均不保留),其移动速度会逐渐降至正常流速。直到前面目标物的氛围完全被流动相替代,前后两部分的距离稳定下来。因而,样品溶剂与流动相洗脱强度差距越大,两部分目标物最终的距离拉的越大。
● 所有目标物在色谱柱中正常移动,但分裂已不可逆转。
经过检测器,同一目标物给出了两个色谱峰。其中进柱前即扩散进入流动相的那部分目标物组成了后面的色谱峰,它的保留时间与目标物的真实保留时间基本吻合。
如何解决溶剂效应
1.溶剂强度
对于这一最普遍的溶剂效应,解决办法即调整稀释剂或流动相,使二者洗脱能力接近,或稀释剂洗脱能力稍低于流动相都是可以的。一般情况下,为避免溶剂强度差异导致的溶剂效应,反相色谱中较为稳妥的做法是稀释剂与流动相保持一致,若流动相或流动相中的有机相无法直接溶解样品,则用可以溶解样品的溶剂溶解成高浓度储备液,然后用流动相稀释至所需浓度。
2.降低进样体积
当样品溶剂洗脱能力大于流动相时,由于样品溶剂瞬时流动相的作用,容易产生峰形前延。峰形前延的程度与进样量有关,进样量越大,前延越厉害,溶剂效应越明显。反之进样量越小,溶剂效应也越小。因此降低进样体积能有效削弱或消除溶剂效应。
3.电离状态
电离状态的差异许多情况下会表现为保留时间的漂移或不稳定。可以通过将样品溶液的pH调节至与流动相一致,或增大流动相的缓冲能力来改善。
4.柱前管路
对于梯度洗脱而言,在不影响分离度的情况下,可以改用较粗内径的柱前管路。(注意:若是等度洗脱,此方法会降低柱效;若是梯度洗脱,基本不影响柱效)。
作者:袁凯旭
排版:林哥
审核:邹天骏
如果您想了解更多内容,欢迎联系月旭科技销售人员或拨打400-810-6969服务热线,我们将竭诚为您服务。
04-22 华大吉比爱
精彩回顾|华大吉比爱质谱整体解决方案亮相第五届北京临床质谱论坛04-22 华大吉比爱
汪建:三十而立,要立得正、立得稳,走出一片新的光辉04-22 华大集团
尹烨:想成为对人类历史有伟大贡献的组织,就必须秉承痴心和使命04-22 华大集团
FAQ系列5_初始荧光值无规律变化04-22 NanoTemper
FAQ系列6_初始荧光值有规律变化04-22 NanoTemper
我与NanoTemper的故事(4) 厦门大学_提能增效首选MST!04-22 NanoTemper
今日直播 | PR Panta助力ADC研发04-22 NanoTemper
环境应急演练:苏州佳谱科技展现实力!04-22
ACCSI2024珂睿科技入围科学仪器行业投资潜力榜单并荣获成长潜力企业奖!04-19 珂睿marketing
宁波市政协主席陈龙一行莅临华仪宁创考察调研04-19
鄞州区人民政府副区长陈建恩带队赴华仪宁创开展企业帮扶现场办公会04-19
多因子实验操作二三事,轻松get高通量数据!!!04-19 赛默飞生命科学
高压均质技术在处理淀粉中的应用04-19 SCIENTZ
湖北省一天科技有限公司选购我司HS-STA-001同步热分析仪04-19
科普知识丨聚酰胺PA塑料的机械物理性能04-19
我司HS-STA-002同步热分析仪落户中国-东盟科技创新公共服务平台04-19
广东广纺检测技术股份有限公司二次选购我司炭黑含量测试仪04-19
【展会通知】2024年陕西省药学会第三届药品质量控制与检验技术大会04-19
世界地球日将至,与Detelogy一起守护地球!04-19 得泰仪器Detelogy