2023-02-09 17:30:35, 月旭科技 月旭科技(上海)股份有限公司
(图片来源:包图网)
在样品检测中,经常会出现一个纯度较高的单成分对照品,进样后却出现分裂峰,甚至直接呈两个峰的状态。除了色谱柱被污染,色谱柱损坏等原因外,还有可能是检测方法不当,比如pH值不合适,离子试剂浓度不当等原因。
实例一(离子对试剂浓度不当):
酸碱性化合物在不同pH下呈现不同的状态,不合适的pH条件下化合物出现分子态和离子态共同存在的情况,导致峰分裂甚至直接呈两个峰。
色谱柱:Ultimate® LP-C18 4.6×300mm,5μm
流动相:1g/L庚烷磺酸钠(pH2.0):甲醇=90:10
图1.1g/L庚烷磺酸钠条件下的峰分裂
流动相:2g/L庚烷磺酸钠(pH2.0):甲醇=80:20
图2.2g/L庚烷磺酸钠条件下的峰分裂
结论:离子对作为比较特殊的分离模式,其间往往作用力是多方作用,增加离子对能够是两个改善峰形,改善分裂峰,同时也可能需要微调其他条件来辅助。
实例二(pH值不当):
离子对试剂与化合物结合后使保留时间得以延长,但如果离子对试剂的使用量不当,化合物与离子对结合不完整,导致待测成分部分结合,也会呈现两种状态,导致峰分裂。
色谱柱:Ultimate® LP-C18 4.6×250mm,5μm
流动相:10mmol/L磷酸二氢钾:甲醇=80:20
图3.pH3.5条件下
图4.pH1.8条件下
结论:调整流动相的pH后,使化合物在特定环境中保持稳定且单一的状态,从而不呈现分裂峰。勘误:实例一与实例二第一段落内容位置互换
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