全球知名CDMO企业使用Maurice替代PA 800 Plus

2022-11-20 03:18:43, ProteinSimple ProteinSimple

Fujifilm北卡罗来纳州分部进行了一项研究，结果Maurice可以满足两项标准，用来替代PA800 Plus：主要峰的峰面积百分比和相对迁移时间（RMT）的RSD≤10%。

Fujifilm作为一家全球性CDMO公司，他们的行业重点是将细胞培养、微生物发酵、细胞和基因治疗方面的技术领导力与世界级的cGMP生产设施结合起来，以推动未来药物的发展。因此，Fujifilm审查过的技术需要严格的实验逻辑和数据来证实结果。

数据显示，Maurice CE-SDS的数据结果不仅与PA 800 Plus的历史数据具有很好的可比性，某些样品的Maurice CE-SDS结果具备更高的分辨率，且实验数据的RSD值明显低于10%，从而通过了Fujifilm的审查标准。用户反馈Maurice的卡盒设计是稳定且可重复使用的，Maurice系统使用起来更简便，使用Maurice的CE-SDS分析更有利于QC质量控制。

实验设计

在Maurice和PA800 Plus上分别分析了5种单克隆抗体（mAb1、mAb2、mAb3、mAb4和mAb5）和ProteinSimple的 IgG还原和非还原样本，评估Maurice的批内和批间重复性（不同卡盒和不同天）。使用2个卡盒，连续3天进行实验，对每个单克隆抗体重复三次进样，并且每个卡盒在非还原和还原样品之间交替使用，以检测是否会发生残留。

还原结果

所有还原的样品都使用了Maurice CE-SDS的默认方法，不需要任何优化。图1A和1B是mAb 2和mAb4的代表性电泳图，每个图都显示了三针叠图。这些数据显示出极好的重现性。此外，图2显示即使没做任何平滑处理，Maurice的图谱也显示出与PA800 Plus图谱的可比性。

图1 Maurice还原CE-SDS的mAb2（A）和mAb4（B）的电泳图

图2 Maurice和PA800 Plus还原样品的CE-SDS对比

表1显示了Maurice的还原CE-SDS峰面积百分比分析结果。分别计算了轻链（LC）和重链（HC）峰面积百分比的标准偏差（SD）和RSD值。所有样品的平均峰面积百分比RSD为1.8%。表2显示了平均RMT的SD和RSD，所有样本的平均RMT RSD为0.15%。

表1 平均相对迁移时间

表2 平均峰面积百分比

非还原结果

虽然仪器默认的方法对大多数非还原样品都有效，但mAb3和mAb5因其分子的特殊性，略微延长了分离时间。图3A和3B分别显示了mAb3与mAb5 数据的三针叠图，并证明了该方法的重现性。

图3 Maurice非还原CE-SDS的mAb3（A）和mAb5（B）的电泳图

图4是Maurice和 PA800 Plus非还原CE-SDS图谱的对比。两者图谱除了具有可比性外，Maurice的图谱显示出更好的分辨率。

图4 Maurice和PA800 Plus的非还原样品CE-SDS对比

表3显示了Maurice的非还原CE-SDS峰面积百分比分析结果。计算了完整IgG峰面积百分比的SD和RSD值。所有样品的平均峰面积百分比RSD为0.18%。表4显示了平均RMT的SD和RSD，所有样本的平均RMT RSD为0.42%。

表3 平均相对迁移时间

表4 平均峰面积百分比

非还原实验的进样条件要求在4,600V电压下注入20秒，但对于mAb2这两个参数都进行了优化。图5显示了在5,000V电压下3个不同注射时间的实验结果。增加进样时间会导致完整峰型的上升，但小图中显示的双峰在35秒的注入时间下得到了最佳结果。因此，mAb2样品的最佳进样参数被确定为5,000V下35秒。