HPLC常见问题及解决方法

2022-11-16 16:41:02, 月旭科技 月旭科技(上海)股份有限公司


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基线漂移    

01

原因及解决办法

柱温波动:控制好柱子和流动相的温度,检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱。

流通池被污染或有气体:用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池(最好断开柱子)。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用盐酸)。

紫外灯能量不足:更换新的紫外灯。

流动相污染、变质或由低品质溶剂配成:检查流动相的组成,使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂。

流动相的pH值没有调节好:加适量的酸或碱调至最佳pH值。

保留时间变化    

02

原因及解决办法

柱温变化:在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。

色谱柱没有平衡好:在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。

柱污染:每天冲洗柱。

柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相。

柱寿命到:更换色谱柱。

出现拖尾峰    

03

原因及解决办法

柱超载:降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相。

柱干扰:清洁样品,调整流动相。

柱效下降:采用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱。

柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,增加在线过滤器,过滤样品。

柱塌陷或形成短通道:更换色谱柱,采用弱腐蚀条件。

死体积或柱外体积过大:连接点降至最低,对所有连接点做合适调整,尽可能采用细内径连接管。

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