No.12 | 尼麦角林的有关物质分析（欧洲药典EP9.0方法）

客户提供了尼麦角林原料药及相关杂质混合对照品少量，希望本实验室依据欧洲药典EP9.0方法，选择合适的C18色谱柱来实现尼麦角林的有关物质分析。

在EP9.0方法中，要求使用规格为4.6mm*150mm*3.5μm的C18色谱柱，由于CP系列没有3.5 μm粒径的C18色谱柱，故直接选用规格为4.6mm*150mm*3.0μm的中等极性色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII进行分析。

首先对杂质混合对照溶液进行分析。如图1，通过梯度调整，尼麦角林出峰时间在39 min左右，各峰间分离度均在2.0以上，且出峰行为与EP9.0所给标准图谱基本一致（附图I）。

▲图1 CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱分析杂质混合对照溶液所得色谱图（G1）

▲附图I  标准图谱

进一步在此条件下分析供试品和溶剂空白，如图2，亦得到良好分析结果，杂质A与主峰间分离度为3.95，大于EP9.0分离度不小于2.0的要求。

▲图2 CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱分析供试品及空白溶液所得色谱图（G1）

与客户沟通以上实验结果，客户反馈杂质D和C保留稍弱，希望进一步优化条件以增强保留。

为此，我们将流动相A中乙腈比例由30%降低至20%，同时优化梯度条件。

如图3，杂质D峰保留时间由2 min延长至4 min，杂质C峰的保留明显亦增强，保留时间由4 min延长至10 min，杂质A与主峰间分离度为3.54，满足药典分离度不小于2.0的要求。

▲图3 CAPCELL PAK C18 MGII色谱柱分析供试品及空白溶液所得色谱图（G2）

综上实验结果，按照欧洲药典EP9.0方法，使用中等极性的CAPCELL PAK C18 MGII S3; 4.6 mm i.d. × 150 mm色谱柱，通过优化梯度条件，能够实现尼麦角林的有关物质良好分析，主峰前杂质A与主峰间分离度在3.0以上，满足EP9.0中分离度不小于2.0的要求。