No. 40 | CAPCELL PAK C18 BB耐碱性色谱柱介绍

CAPCELL PAK C18 BB

的基本特性

Keywords : 耐碱性、碱性流动相、苯甲醇、5-羟色胺

CAPCELL PAK C18 BB色谱柱因其独特的表面处理技术而具备卓越的耐碱性。

本次试验使用pH=10的流动相条件对其耐碱性进行了研究，同时，使用能耐受pH=12条件的有机杂化硅胶ODS柱作为对照。

如图1，以10 mmol/L NH4HCO3 (pH 10, NH4OH)/ CH3OH = 90 / 10作为流动相，柱温设定为40℃，通过调查苯甲醇的保留时间变化对色谱柱耐久性进行评价。另外，样品中添加了碱性化合物5-羟色胺，通过其保留时间的变化可以研究填料表面状态。

▲图1 pH=10流动相条件下苯甲醇及5-羟色胺保留时间的变化

如图1，随着通液时间的延长，两款色谱柱对苯甲醇的保留虽然均有所减弱，但保留时间的维持率分别为94.4％和89.6％，CAPCELL PAK C18 BB色谱柱的耐久性更强；同时，杂化型ODS色谱柱随着通液时间的延长，对5-羟色胺的保留有增强的趋势。

图2为CAPCELL PAK C18 BB及杂化型ODS色谱柱初次进样分析时所得色谱图。

▲图2 CAPCELL PAK C18 BB及杂化型ODS色谱柱初次进样所得色谱图

如图2，使用杂化型ODS色谱柱对5-羟色胺进行分析，所得色谱峰有拖尾现象，推断为硅胶表面残留硅醇基与碱性化合物所带正电荷相互吸附带来的影响。同时，具有残留硅醇基的杂化型ODS色谱柱在pH=10的流动相条件下，键合的C18烷基随着通液的同时容易脱落，导致图1所示结果中，5-羟色胺的保留也大大增强了。

综上所述，对于碱性流动相条件下使用的耐受性，即使是能耐受pH=12条件的杂化型ODS色谱柱，在pH=10的条件下也会发生C18烷基的脱落；与此相对，CAPCELL PAK C18 BB色谱柱在更加严苛的条件下对耐久性进行了评价，相对于以有机杂化硅胶作为填料的ODS色谱柱来说耐久性更强，同时因为聚合物包被技术使其残存硅醇基更少，所以性能更加优越。

▲图3 CAPCELL PAK C18 BB色谱柱苛刻的耐碱性测试

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CAPCELL PAK C18 BB

在碱性条件下对碱性化合物的分析

Keywords : 耐碱性、碱性化合物、碱性流动相

当分析碱性化合物时，色谱柱的选择和流动相条件的制定至关重要。下面将展示使用CAPCELL PAK C18 BB色谱柱在碱性流动相条件下进行分析时，碱性化合物的溶出行为。

CAPCELL PAK C18 BB色谱柱因其表面处理技术而具备优越的耐碱性，可以在pH=11的碱性流动相条件下稳定使用。

如图4，以中性化合物倍他米松及6种碱性化合物（普萘洛尔、苯海拉明、盐酸异丙嗪、丙咪嗪、阿米替林、氯丙嗪）作为样品，在pH=10条件下使用CAPCELL PAK C18 BB色谱柱、在pH=10和pH=12条件下使用杂化型ODS色谱柱分别进行分析。

▲图4 CAPCELL PAK C18 BB及杂化型ODS色谱柱分析色谱图

1. 倍他米松 (150 ppm)

2. 普萘洛尔 pKa = 9.5 (25 ppm)

3. 苯海拉明 pKa = 9.0 (100 ppm)

4. 盐酸异丙嗪 pKa = 9.1 (100 ppm)

5. 丙咪嗪 pKa = 9.4 (100 ppm)

6. 阿米替林 pKa = 9.4 (50 ppm)

7. 氯丙嗪 pKa = 9.1 (100 ppm)

当pH=10时，将两款色谱柱的保留能力进行比较，可以发现CAPCELL PAK C18 BB色谱柱的保留能力更强。另外，当流动相的pH值提高时，质子化受到抑制，因此对于碱性化合物的保留会增强，但是CAPCELL PAK C18 BB色谱柱在pH=10条件下的保留就已经比杂化型ODS色谱柱在pH=12条件下强了，无需在更碱性条件下分析。

如图5，使用pH=10流动相条件，对亲水性强的碱性化合物组织胺和5-羟色胺进行分析；使用了两种杂化型ODS色谱柱和CAPCELL PAK C18 BB进行对比。

▲图5 CAPCELL PAK C18 BB及杂化型ODS色谱柱分析色谱图

3款色谱柱对组织胺及5-羟色胺均得到了一定程度的保留，其中CAPCELL PAK C18 BB和杂化型ODS B对组织胺的保留稍强一些，杂化型ODS B对5-羟色胺的保留能力最强，但从拖尾可以看出，这是由于5-羟色胺与填料表面残存的硅醇基之间发生了相互作用导致的。

与此相对，CAPCELL PAK C18 BB色谱柱能得到非常良好的峰形，并且与杂化型ODS色谱柱B相比，能得到1.5倍的理论塔板数。

综上所述，CAPCELL PAK C18 BB色谱柱对碱性化合物能取得良好保留与峰形，在pH=10的碱性流动相条件下也能展现出良好的分析能力。