No.162 | 《化妆品安全技术规范（2015年版）》氨基己酸的测定-面霜、乳液、粉底

大阪曹達｜三耀精细

第162条推送   每周五17:00准时更新

氨基己酸 Aminocaproic Acid

氨基己酸为止血药，用于预防及治疗血纤维蛋白溶解亢进引起的各种出血。在2015版《化妆品安全技术规范》中规定氨基己酸为禁用组分。

大曹三耀技术中心按照2015版《化妆品安全技术规范》，对氨基己酸标准品和化妆品实际样品进行了分析，本期YoYo老师将良好分析结果分享给大家。

本期探讨的主要问题

1、使用CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱可得到氨基己酸标准品以及面霜、粉底液样品的良好分析结果。

2、使用CAPCELL PAK C18 MGS5; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱，乳液样品中氨基己酸出峰位置有基质干扰。

3、将色谱柱更换为CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d. × 250mm或CAPCELL PAK ADME-HR S3; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱，并调整流动相为100%纯水相后，基本可以排除乳液样品中基质峰对氨基己酸出峰的干扰。

按照2015版《化妆品安全技术规范》中氨基己酸测定项下方法，使用CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d ×250mm色谱柱，对氨基己酸标准品进行分析，结果如图1所示，主峰保留时间为7.628 min，保留良好。

图1  氨基己酸标准品溶液分析色谱图

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d.×250mm (AKAD50006)

流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵（磷酸调pH值至3.0）/甲醇 = 98/2

流 速：1.0 mL/min

温 度：25 °C

检 测：PDA 210 nm

进样量：20 µL

浓 度：250 µg/mL（溶剂为水）

1. 氨基己酸标准曲线的制作

配制10.0 µg/mL, 50.0 µg/mL, 100.0 µg/mL，250.0 µg/mL，500.0 µg/mL系列标准工作液进行标准曲线的制作。以峰面积为纵坐标，标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线。如图2所示，氨基己酸在10.0 µg/mL—500.0 µg/mL浓度范围内线性良好，相关系数R2=0.99998。

图2 氨基己酸标准品浓度-峰面积标准曲线图

对浓度为500.0 μg/mL的氨基己酸标准品溶液进行精密度测试，连续进样6针，峰面积RSD%为0.11%，精密度良好。

2. 样品分析

样品溶液，按照2015版《化妆品安全技术规范》中样品处理方法进行操作。

分别称取乳液、面霜及粉底液样品各约0.02g与1mL样品管中，加入0.05mL饱和氯化钠溶液，旋涡振摇1min，用流动相稀释至1mL，超声浸提20min，于15000rpm离心5min。上清液经0.22μm滤膜过滤，待测。

我们在上述条件下，使用C18 MG色谱柱对处理后的乳液、面霜和粉底液样品进行分析，结果如图3~7所示，面霜和粉底液样品中未检出氨基己酸，且在氨基己酸出峰位置没有基质干扰；但乳液样品中在氨基己酸出峰位置有基质干扰，根据基质干扰峰光谱图与标准品光谱图对比不完全一致（见图4、5）。

图3 乳液样品溶液及标准品溶液分析图

图4  氨基己酸标准品光谱图

图5 乳液中基质干扰峰光谱图

图6 面霜样品溶液及标准品溶液分析图

图7 粉底液样品溶液及标准品溶液分析图

色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d.×250mm (AKAD50006)

流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵（磷酸调pH值至3.0）/甲醇 = 98/2

流 速：1.0 mL/min

温 度：25 °C

检 测：PDA 210 nm

进样量：20 µL

浓 度：标准品：250 µg/mL（溶剂为水）

样品：分别称取乳液、面霜及粉底液样品约0.02g与1mL样品管中，加入0.05mL饱和氯化钠溶液，旋涡振摇1min，用流动相稀释至1mL，超声浸提20min，于1500rpm离心5min。上清液经0.22μm滤膜过滤，待测。

由于流动相中水相比例较高，我们将色谱柱更换为可以在100%纯水相下稳定使用的具有高表面极性的C18 AQ色谱柱和键合特殊官能团金刚烷基的超高表面极性的ADME-HR S3色谱柱分别对标准品和乳液样品进行了分析。为了消除乳液样品中基质在氨基己酸出峰位置的干扰，我们将流动相调整为纯水相，分析结果见图8~10。在C18 AQ和ADME-HR S3色谱柱上基本可以排除乳液样品中基质对氨基己酸出峰位置的干扰。

图8 C18 AQ分析氨基己酸标准品溶液及乳液样品溶液结果图

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d.×250mm (A6AD10471)

流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵（磷酸调pH值至3.0）

流 速：1.0 mL/min

温 度：25 °C

检 测：PDA 210 nm

进样量：20 µL

浓 度：标准品：250 µg/mL（溶剂为水）

样品：称取乳液样品约0.02g与1mL样品管中，加入0.05mL饱和氯化钠溶液，旋涡振摇1min，用流动相稀释至1mL，超声浸提20min，于1500rpm离心5min。上清液经0.22μm滤膜过滤，待测。

图9 ADME-HR S3分析氨基己酸标准品溶液及乳液样品溶液结果图

色谱柱：CAPCELL PAK ADME-HR S3; 4.6mm i.d.×250mm (A44HAD01017)

流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵（磷酸调pH值至3.0）

流 速：0.7 mL/min

温 度：25 °C

检 测：PDA 210 nm

进样量：20 µL

浓 度：标准品：250 µg/mL（溶剂为水）

样品：称取乳液样品约0.02g与1mL样品管中，加入0.05mL饱和氯化钠溶液，旋涡振摇1min，用流动相稀释至1mL，超声浸提20min，于1500rpm离心5min。上清液经0.22μm滤膜过滤，待测。

综上所述，使用大曹三耀CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱按照2015版《化妆品安全技术规范》中氨基己酸测定项下方法进行分析，可得到氨基己酸标准品以及面霜、粉底液样品的良好分析结果，但乳液样品分析中氨基己酸出峰位置有基质干扰，二者光谱比对不一致。

将色谱柱更换为可以在100%纯水相下使用的CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d. × 250mm或CAPCELL PAK ADME-HR S3; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱，并调整流动相为纯水相后，基本可以排除乳液样品中基质峰对氨基己酸出峰的干扰。

由于流动相中的水相比例较高，结合色谱柱的耐水性和对实际样品的分离情况，可以考虑使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6mm i.d. × 250mm色谱柱进行测定。

No1. CAPCELL PAK ADME-HR

吸粉超能力

CAPCELL PAK ADME-HR 是大阪曹達集团独创的、市面上唯一的一种特殊填料类型色谱柱。