2022-08-11 18:01:09, YoYo老师 三耀精细化工品销售(北京)有限公司
峰呢?我的峰去了哪里?
某天开机实验,色谱图一马平川…
峰呢?我的峰呢?要疯了啊啊啊啊…
怎么办!!!
别怕,YoYo又来帮助你了~
排查位点
遇到不出峰问题:
首先,判断原因——即不出峰发生位点。
-排查方法-
将色谱柱从仪器中取下,接入两通后再次进样
▷依旧不出峰——仪器系统出现问题
▷出峰——色谱柱洗脱或平衡问题
原因&解决问题
1
仪器系统方面导致不出峰
-常见原因及解决方法-
【检测器部分】
★检测方法不合适
紫外选择波长不合适
质谱荷质比以及参数设立不合适
荧光发射吸收波长不合适
样品浓度过小检测器灵敏度不够...
→此时需要对检测方法进行优化调整
★检测器自身出现问题(如灯寿命到了)
→需要咨询相应仪器工程师进行更换
【进样器部分】
进样针进气泡导致样品并未真正进样成功,一般通过洗针即可解决。
2
色谱柱方面导致不出峰
-常见原因及解决方法-
【洗脱不足】
现有分析条件无法对目标物质进行良好洗脱,需对分析条件进行调整:
★反相系列色谱柱——提高有机相比例(PS: 注意不要发生盐析哦)
★离子交换系列色谱柱——提高用于离子交换的盐浓度
★HILIC系列色谱柱——适当提高水相比例
【平衡不充分】
若使用离子交换色谱柱,或离子交换模式分析时,初次平衡需要充足的平衡时间,建议使用流动相小流速平衡过夜。
HPLC Conditions:
色谱柱:CAPCELL PAK NH2 UG80 S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流动相:磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾2.72g溶于1000 mL水中) / CH3CN = 45 / 55
流 速:40°C
检 测:PDA 286 nm
浓 度:1 mg/mL
进样量:20 µL
于是,现在不出峰的问题还是问题吗?
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