质谱流式研究成果精选（4）

2020-11-27 18:42:55, Fluidigm 思百拓（上海）仪器科技有限公司

为了评估癌症和抗肿瘤治疗在新冠肺炎中的作用，以色列Rambam Health Care Campus的研究人员应用CyTOF®技术，对癌症患者(被认为是潜在的感染高危人群)进行了一项纵向研究。这项研究的参与者包括了接受积极治疗的癌症患者和部分医护人员。参与者中有少数SARS-CoV-2 IgG+病例被确诊(164名癌症患者中有4例，107名医护人员中有2例)，无一例出现症状。在这项研究中使用了包含39个Marker的CyTOF Panel对表面Marker的表达进行检测，以鉴定主要的免疫细胞谱系。在SARS-CoV-2 IgG阳性的医护人员中，髓系细胞显著减少(≈为90%)，而在SARS-CoV-2IgG阳性的癌症患者中，髓系细胞减少相对较轻(≈为50%)。两组SARS-CoV-2 IgG+患者的NK细胞和B细胞水平相似，树突状细胞无明显差异。结果表明，癌症患者对SARS-CoV-2表现出不同的宿主反应，癌症治疗对新冠病毒感染的影响有待进一步研究。

参考文献：

Goshen-Lago, T. etal. “The potential role of immune alteration in the cancer-COVID19 equation – aprospective longitudinal study.” Cancers 12 (2020): 2421.

近日，弗莱堡大学（University of Freiburg）的研究人员通过将质谱流式技术与MHCI-四聚体技术相结合，来确定新诱导的和预先存在的SARS-CoV-2特异性CD8 T细胞应答。研究人员对25例新冠肺炎恢复期患者的PMBC样本用抗ß2m钯barcode进行barcoding，并用包含42个marker的CyTOF® Panel进行表面和细胞内靶点染色。他们的研究结果总结发现：1. 出现表型多样且功能正常的SARS-CoV-2特异性记忆CD8 T细胞，这些细胞与流感特异性CD8 T细胞表现出相似的特征。2. SARS-CoV-2特异性CD8 T细胞应答比抗SARS-CoV-2刺突蛋白抗体更容易被检测到。3. 临床解决后很长时间仍可检测到t细胞，但无法检测到抗体应答。这项研究使用CyTOF®独有的金属标记四聚体技术，为研究SARS-CoV-2特异性CD8 T细胞应答的异质性和特异性提供了有价值的见解。

参考文献：

Schulien, I. et al. “Exvivo detection of SARS-CoV-2-specific CD8+ T cells: rapid induction,prolonged contraction, and formation of functional memory.” bioRxiv(2020): doi:10.1101/2020.08.13.249433

为了更好地了解新冠肺炎的免疫相关性，弗吉尼亚梅森大学贝纳罗亚研究所（the Benaroya Research Institute）的一个团队开发了一种包含33个参数的细胞毒转运蛋白(CyTOF®) panel，以表征59名急性新冠肺炎患者的纵向免疫反应。研究指出：1. COVID-19患者的免疫系统形成三个与疾病严重程度相关的主要集群。2. 重症COVID-19患者与其他危重患者有一些共同的免疫变化，这表明某些变化是危重疾病的特征，并不是COVID-19所独有的。3. 在重症新冠肺炎患者中，观察到托西珠单抗治疗的明显急性特征，而在恢复期血浆治疗中，没有观察到免疫状况的急性变化。

参考文献：

Bolouri, H. et al.“The COVID-19 immune landscape is dynamically and reversibly correlated withdisease severity.” bioRxiv (2020): doi:10.1101/2020.09.18.303420

利用病毒特异性T细胞进行过继细胞治疗对病毒感染治疗很有帮助，为研究这种方法在COVID-19相关治疗中的应用，MD安德森癌症中心的研究人员使用了包含40个Marker的CyTOF® Panel，对8位已康复的COVID-19患者捐献的SARS-CoV-2扩增T细胞进行了全面分析。研究表明: 1. 病毒特异性CTL不表达高水平的免疫检查点抑制Marker，与耗竭T细胞的表型相反。2. 对功能性Marker的分析揭示了一种细胞毒性Th1表型，其特征是IFN-γ, TNF-α 及 granzyme B的表达，表明了其具有间接抗病毒杀伤能力。3. 对两种培养条件下的细胞扩增做了比较，未发现激活和功能Marker的表达有重大差异。4. 研究结果表明，可对SARS-CoV-2抗原应答的多功能性、未衰竭的T细胞可以从已康复患者的血液样本中扩增。

参考文献：

Basar, R. et al.“Generation of glucocorticoid resistant SARS-CoV-2 T-cells for adoptive celltherapy.” bioRxiv (2020): doi:10.1101/2020.09.15.298547.

波士顿儿童血小板研究中心（Boston Children’s Center for Platelet Research Studie）的Ben Spurgeon和Larry Frelinger认为，在各种与血小板有关的疾病中，血小板图谱可能是一个有价值的工具。由于使用常规流式细胞仪在识别血小板上的Marker数量受到限制，他们开发了一种专利的血小板图谱技术，使用质谱流式技术及仪器系统来更好地描绘不同的血小板亚群。这项创新技术将用于一项临床研究(NCT03810352)，将血小板功能标志物与一种以低血小板计数为特征的自身免疫性出血疾病的出血症状相关联。通过使用CyTOF®，可以比之前的一项研究多检测15个标志物，该研究发现某些血小板激活标志物与更严重的出血有关。这项技术提示为其他潜在应用，包括乳腺癌、心血管疾病和新生儿输血等相关研究提供了参考。

参考文献：

Blair, T.A. andFrelinger, A.L. 3rd “Platelet surface marker analysis by masscytometry.” Platelets 31 (2020): 633–640.

迄今为止，CyTOF^®是唯一一个助力发表超过1000篇科研文献的高参数单细胞分析平台，被广泛应用于生物学和医学研究的多个领域的研究工作。其高效简洁的工作流程以及广泛的适用性，正逐渐成长为当今最先进的细胞分析工具之一。

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