2020-07-20 16:33:24 北京桑翌实验仪器研究所
二氧化碳培养箱,作为生物工程所需要的设备,是细胞、组织、细菌培养的关键设备。而作为重中之重的细胞培养,二氧化碳培养箱需要严格密封,并准确控制腔体内部的参数如:温度、样品的pH以及相对湿度。而温度37℃、pH7、大于90%的相对湿度则是目前常用的细胞培养的良好条件。
为什么需要二氧化碳?
为了在良好条件下培养细胞,生长的介质需要保持中性pH值(大约在pH7)。H2O和CO2的结合导致碳酸氢盐(HCO3-)和H2CO3保持pH中性,因此发现对生物细胞生长的影响较少。换句话说,通过在正确的水平上添加额外的CO2,可以防止细胞内的pH值变成碱性或酸性,这两者都抑制细胞生长。
如何维持二氧化碳浓度?
为了能够控制培养箱腔体内部的CO2浓度,就需要检测CO2浓度。因此常选用红外传感器来检测内部的CO2浓度。当检测的浓度低于设定值时,通过程序准确地添加的CO2气体直到达到设定值。由于培养箱内部需要高湿度,因此目前的传感器都是抗湿度或包裹过滤材质。
培养特殊细胞或细菌该如何处理?
为了应对高耗氧细菌或者厌氧细菌时,在使用二氧化碳培养箱则需要引入其它气体如O2或者N2来提供合适的气体环境,即三气培养箱。当培养的菌落是好氧菌,且所需的氧气浓度大于空气浓度时(20%),则需要在培养箱中通入O2。当培养的菌落是厌氧菌,则需要在培养中再通入N2,用以稀释腔体内部的O2浓度(低于20%)。由于CO2及O2传感器技术成熟及兼顾成本,同时节约了制造成本,所以没有氮气的控制。氮气含量计算方法:氮气=100%-CO2浓度-O2浓度。
为什么需要三气培养箱?
正常大气的氧气浓度在21%,如小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)在3%的氧气浓度下培养会比在20%的氧气浓度下,会成长更健康,DNA损坏更少以及更少的应激反应。还有更多的细胞如免疫细胞、干细胞等都有需要低氧气浓度的培养条件。因此三气培养箱的存在是必不可少。
WIGGENS 三气培养箱非常适合动物细胞培养、生殖细胞培养、厌氧细胞培养。适合所有微生物的培养及孵化实验,种子培育及组织培养实验需求。
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