2020药典｜苦参中氧化苦参碱和苦参碱的测定

2020-07-09 05:32:02, 岛津实验器材岛津（上海）实验器材有限公司

摘要

本文建立了苦参中氧化苦参碱和苦参碱的 HPLC 测定方法。结果表明，按照 2020 版《中国药典》中色谱条件，采用色谱柱 Shim-pack GIST C18 分析苦参中氧化苦参碱和苦参碱，氧化苦参碱和苦参碱的峰形对称，理论塔板数大于 4000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为苦参中氧化苦参碱和苦参碱的检测提供参考。

实验部分

1.1 实验仪器与耗材

Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：Shim-pack GIST C18
（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30017-08；S/N：19G04828）；
SHIMSEN Disc针式过滤器（P/N：380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-100、SHIMSEN Pipet PMII-1000。

1.2 对照品溶液的制备

取苦参碱对照品、氧化苦参碱对照品适量，精密称定，加乙醇分别制成每1mL 含苦参 50 μg、氧化苦参碱 0.15 mg 的溶液，即得。

1.3 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛）约 0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨试液 0.4 mL，精密加入三氯甲烷 25 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率 250 W，频率 33 kHz) 40 分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液 10 mL，回收溶剂至干，残渣加无水乙醇适量使溶解，转移至 10 mL 量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。

1.4分析条件

色谱柱：Shim-pack GIST C18（5 μm，4.6×250 mm；P/N：227-30017-08；S/N：19G04828）；
柱温：20℃
检测波长：225 nm
流速：1.0mL/min
进样量：5 µL（对照品溶液）/ 7 µL（供试品溶液）
流动相：
A：0.01 mol/L 乙酸铵溶液（浓氨试液调 pH8.1）；
B：乙腈-[0.01 mol/L 乙酸铵溶液（浓氨试液调 pH8.1）]（3:2）

梯度程序如下：

结果及讨论

2.1 色谱图

按照上述色谱条件（1.4）进行采集，对照品溶液和供试品色谱图如下：

对照品溶液：

截屏2020-07-06下午4.51.13.png

供试品溶液：

供试品溶液放大图：

重现性：

截屏2020-07-06下午4.59.13.png

截屏2020-07-06下午4.59.05.png

结论

按照 2020 版《中国药典》中色谱条件，建立了苦参中氧化苦参碱和苦参碱的 HPLC 测定方法。结果表明，采用色谱柱 Shim-pack GIST C18 分析氧化苦参碱和苦参碱，氧化苦参碱和苦参碱的理论塔板数大于 4000，且与相邻杂质峰能达到基线分离，满足《中国药典》要求。此方法可为苦参中氧化苦参碱和苦参碱的检测提供参考。