Solentim AEC FL 荧光功能已就绪，等你来升级！

2026-07-08 11:01:45, 诺佤百奥NovaBio Advanced Instruments安达望（上海）科技有限公司

Solentim 全自动单克隆成像产品一直致力于为单克隆建库过程提供高质量的单克隆增殖图片以及单克隆源性证据。单克隆性概率（Probability of Clonality, PoC）——即生产细胞系来源于单个细胞的统计可能性，是监管机构（如 FDA、EMA）在 IND 申报中要求评估的指标，以确保商业化生产的安全性和细胞系的一致性。

PoC 面临的一个主要挑战是“幽灵孔”的风险——这些孔在第 0 天显示无细胞，但随后却长出了细胞团（>1% 汇合度），可能是由于铺板后细胞未及时沉降或第 0 天整孔成像不清晰导致单细胞无法辨识，因此必须证明在克隆过程中这种风险极小或不存在。

Solentim 系列成像产品提供基于明场的高质量图像，图像包含 2-3 个焦面的信号采集，多层焦距避免因成像质量造成的单细胞辨识不到。此外，Solentim专有的基于 AI 的算法的扫描模式 AEC 可识别单细胞及其位置，辅助第 0 天对单细胞的判断。

经验证，Solentim 系列产品基于明场的成像可获得高达 100% 的 PoC, 而 Willson 评分也可达 98.1% 。

Wilson 评分区间是一种统计方法，用于计算统计总体中某个比例的置信区间。与传统的正态近似法不同，后者可能不准确，尤其其是对于小样本量或接近 0 或 1 的比例，而 Wilson 评分区间提供了更准确的估计值。种方法在分析二元结果（例如成功/失败或“是/否”回答）的情况下特别有用。通过利月用 Wilson 评分区间，研究人员和数据分析师可以从他们的数据中获得更可靠的见解，确保他们的结论有理有据。

虽然 Solentim 系列产品明场成像可提供被监管机构接受的 PoC 数据，为了进一步提高严谨性，我们配备并升级了荧光成像模块 AEC 荧光扫描（ AEC FL），该模块不但能够提供清晰的明场图像，还能够提供清晰的红绿荧光图像。基于 STUDIUS 软件平台的 AEC FL 成像模块有三大特点：

采用 precision 扫描算法模型，图像更清晰。

第 0 天荧光图像可整合入单克隆报告中。

使用铺板成像一体机（VIPS PRO），单细胞分离同时可进行无差别阳性细胞筛选。

如图 1 使用稳定表达荧光蛋白的细胞系或活细胞荧光染料染色的细胞进行铺板，从第 0 天开始进行追踪成像，（图 1、2、3），更容易检测到在明场成像下逃脱的异常细胞。如果第 0 天观察到荧光，成像追踪后期发现荧光细胞团，则证明该孔为假阳性孔，从而加强克隆性的证据。

图 1：AEC FL 在 Day 0 识别单个表达 GFP 和单个 RFP 细胞的示例图像。

图 2：AEC FL 在识别和表达 GFP 和 RFP 细胞准确性的图表

图 3：Day-0 时单个 GFP 细胞在 Day-14 形成单一克隆团（左图）和 Day-0 时单个 GFP 细胞在 Day-14 形成 RFP 及 GFP 两个克隆团的假阳性孔（右图）的示例图片。

AEC FL 在 VIPS PRO 和 Cell Metric X 仪器上均可使用，它在明场生成高分辨率全孔图像的基础上，增加了 FITC 和/或 mCherry 通道，并整合了基于 AI 的算法，用于准确检测表达 GFP 或 RFP 等荧光蛋白或染料的细胞。

为确定使用荧光成像 PoC 的值，我们使用按照 50:50 比例混合的分别表达 GFP 及 RFP 的细胞，使用 VIPS PRO铺板，样本量仍为 10 块 96 孔板。使用 Cell Metric X HT 在 2 小时和 14 天（AEC FL）进行成像。平均单克隆形成率（定义为具有一个祖细胞生长成超过 1% 汇合度细胞集落的孔）为 59%。

将 VIPS PRO 铺板、Day-0 和 Day-14 的 AEC 荧光扫描相结合时，未观察到幽灵孔。与明场成像类似，VIPS PRO 结合 Cell Metric X HT ，PoC 达到 100%。最后，如表 2 所述，增加 AEC 荧光成像后，Wilson 评估值将 PoC 从 98.1% 提高到 99.99%，表明与单独使用明场成像相比，使用 AEC FL 进行 PoC 工艺验证时，幽灵细胞风险降低了 190 倍。