No.15｜GB/T 23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定

脱氢乙酸无嗅、无味，作为一种广谱防腐剂，在酸、碱条件下，均有一定的抗菌作用，特别是对霉菌和酵母菌的抑菌能力强，被广泛应用于果汁、腐乳、酱菜、人造奶油、乳酸菌饮料、果酱、糕点、复合调味料等食物中。

本次实验选用中等极性通用型色谱柱CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm，按照国标方法《GB/T 23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法》对脱氢乙酸标准品进行分析，得到结果如图1所示，脱氢乙酸保留时间为11 min左右，理论塔板数为12400，色谱峰形略前延，不对称因子0.81。

▲脱氢乙酸结构式

▲图1 脱氢乙酸标准品分析图

*注：峰上标数字从下至上依次为理论塔板数和不对称因子。

▲附图：国标方法所附标准色谱图

与国标方法所附标准色谱图对比可知，MG色谱柱分析所得结果分析时间更短，且峰形更佳。

【标准曲线的制作】

进一步，按照国标要求配制脱氢乙酸标准工作液，浓度分别为1.0 mg/L、10.0 mg/L、50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L，进行线性考察实验。对各标准工作液按照国标方法进行分析，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，如图2所示，R^2=0.9992，得到良好线性结果。

▲图2 脱氢乙酸标准曲线图

为解决峰形前延的问题，在原方法基础上对液相方法进行调整，尝试将流动相中的0.02 mol/L乙酸铵溶液更换为0.1%磷酸水溶液，同时调整有机相比例。

经过调整，最终结果如图3，脱氢乙酸峰形良好，不对称因子为1.00，理论塔板数为19428，峰形较原方法所得结果有明显改善。

▲图3 脱氢乙酸标准品分析图

（0.1%磷酸水：甲醇=45:55）

*注：峰上标数字从下至上依次为理论塔板数和不对称因子。

继续按此方法对脱氢乙酸标准工作液进行线性考察，以浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线，如图4所示，R^2=0.9944，得到良好线性结果。

▲图4 脱氢乙酸标准曲线图

（0.1%磷酸水 / 甲醇 = 45 / 55）

综上，使用CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm色谱柱，按照《GB/T 23377-2009 食品中脱氢乙酸的测定 高效液相色谱法》对脱氢乙酸标准品进行分析，所得峰形略有前延，但线性良好，能够进行定量检测；同时，将流动相调整为磷酸水-甲醇体系后，峰形得到明显改善，最终得到良好分析结果。