【应用分享】饲料中三聚氰胺的提取与检测（SN/T 5118-2019）

2025-04-23 00:05:25 纳谱分析技术（苏州）有限公司

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三聚氰胺 (Melamine) ，化学式为C₃H₆N₆，俗称蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，常被用作化工原料，不可用于食品加工或食品添加物。为确保食品安全，SN/T 5118-2019该标准规定了对于食用动物和饲料中三聚氰胺的检测方法，因样品基质较为复杂，需进行前处理才能保证目标物被有效提取并检测。纳谱分析推出适配此标准的样品前处理产品SelectCore MCX固相萃取柱和ChromCore Silica色谱柱，为复杂基质中三聚氰胺痕量的检测提供解决方案。

图1.三聚氰胺结构式

一、适用范围

本方法参照SN/T 5118-2019进出口食用动物、饲料中三聚氰胺残留测定液相色谱-质谱/质谱法，适用于饲料中三聚氰胺的测定。

二、实验步骤

1、试剂的准备

甲醇水溶液 (50%) : 准确量取500 mL甲醇和500 mL水混匀后备用。

氨化甲醇溶液 (5%) : 准确量取5 mL氨水和95 mL甲醇混匀后备用。

乙腈水溶液 (95%) : 准确量取50 mL水和950 mL乙腈混匀后备用。

酸性甲醇提取液: 990 mL 50%甲醇水中加入10 mL乙酸混匀后备用。

5 mmol/L乙酸铵溶液: 准确称取0.385 g乙酸铵置于1 L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀后备用。

2、样品前处理

称取2 g试样于50 mL具塞离心管中，加入40 μL 0.1 μg/mL的三聚氰胺同位素内标溶液 (相当于三聚氰胺同位素内标质量为4 ng) ，再加入20 mL酸性甲醇提取液涡旋混匀2 min，超声提取10 min，以8000 r/min 10 ℃冷冻离心5 min，取上清液10 mL转移至15 mL离心管中，待净化。

3、固相萃取方法

SelectCore MCX固相萃取柱 60mg/3mL

活化：依次使用3 mL甲醇、3 mL水活化；

上样：将制备好的待净化液转移至固相萃取柱中；

淋洗：依次使用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，结束后抽至近干；

洗脱：用6 mL氨化甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；

复溶：洗脱液于40 ℃下氮气吹干，残留物用1 mL 95%乙腈水定容，涡旋混合1 min，过微孔滤膜后，供LC-MS/MS测定。

*注：整个固相萃取过程流速不超过1 mL/min

4、液相色谱条件

ChromCore Silica色谱柱 3μm, 2.1×100mm

5、质谱条件

三、实验谱图

图2.三聚氰胺标准品、饲料样品、饲料样品加标对比谱图

(加标量: 20.0 μg/kg)

加标回收率数据

样品	加标量	回收率
饲料样品	20.0 μg/kg	101.75%

四、实验结果及讨论

由实验谱图及加标回收率数据可知，纳谱分析的SelectCore MCX固相萃取柱可以有效去除样品基质干扰，ChromCore Silica色谱柱可以有效分离杂质和目标物，并且回收率符合检测要求。

实验注意事项：

1、若待净化液浑浊，可以考虑再次离心，避免上样过程中堵柱子，导致过柱时间太长；

2、增加提取次数可以提高提取效率；

3、HILIC体系中仪器稳定时间较长，建议在进样前走10针稳定性测试。

相关产品货号信息

常规规格货号
产品描述	货号
ChromCore Silica色谱柱 3μm, 2.1×100mm	A003-030012-02110S
SelectCore MCX固相萃取柱 60mg/3mL	MCX060-030060-1
ChromCore Silica保护柱柱芯 3μm, 2.1×10mm	A003-030012-02101S-B1
保护柱卡套（分体式，带连接件）	Guard-HPLC-A1