基质曲线定量，细节决定成败！

基质曲线定量是质谱检测中常用的一种定量手段。由于四极杆对化合物的分离能力优异，待测化合物在色谱柱中并不需要完全的基线分离，因此我们在实验中，为了缩短分析时间，设置的梯度洗脱程序往往较随意，这会使得杂质与目标物没有分离完全，最终导致杂质与目标物相互竞争离子化，影响目标物的响应，即造成基质效应。

基质效应分为正效应和负效应，具体体现在目标物响应的增加和降低，这部分的响应变化是与回收率无关的。通常我们会使用样品的前处理液配制标准曲线进行定量，即基质曲线。使用基质曲线定量的好处是，不用购买昂贵的同位素内标物，但同时，要做到准确定量，也有以下一些细节需要注意。

这很好理解，例如测定农残项目，不同的蔬菜水果，成分差异很大，造成的基质效应是不一样的。但是否不同的苹果样品，都要分别用对应的基质液呢？作者的建议是：对的，需要。

因为不同的样品，里面的糖分和酸、色素等内源性成分都是有差异的，而这些成分的占比是远大于目标物的，同时也是基质效应形成的重点原因。

再举一个例子：不同段的婴幼儿奶粉哪怕基粉是一样，但添加的维生素、脂质、蛋白的种类和量都是不一样的，这些添加物最终也有可能是导致基质效应的重要原因。

除非是成分或工艺很相似，差异很小的样品，例如同一类食品接触材料、白醋、果葡糖浆等一些生产原料，这类样品使用一个样品的基质液就可以，但具体还是通过结果来评判。

用阳性样品的基质液配制曲线，虽然不会改变曲线的斜率，但是会提高曲线的截距，这样多了一个校正的参数。同时，如果处理液较少，还需要制备多个样品来获得处理液。这时候还要注意一定要先将处理液混合，再配制曲线。不然平行实验之间的误差有可能会导致曲线的相关系数较低，影响曲线的定量能力。

当样品均为阳性的情况下，我们需要对前处理中的稀释倍数进行调整。使该样品目标物的上机浓度维持在曲线浓度的中间点以下，减少本底值对斜率的影响。如果是同时测定多种化合物，且含量差异较大，则需要对样品的含量（浓度）分组，根据分组采用不同的稀释倍数配制基质曲线。

很多化合物在浓度范围较大的情况下，纯溶剂曲线都是呈很好的线性关系的。但是用基质液配制曲线时，对于浓度很小和浓度很大的点，基质效应就有可能会不一样了。

以最常见的负效应为例，大量基质存在的情况下，浓度增大，离子化程度有可能会被抑制。但最终还是需要评判曲线的相关系数，相关系数较高，那就没有问题。

基质效应过大说明基质对化合物的测定影响是严重的，这会导致测定的结果有可能存在很大的偏差。当测定结果出现问题时，会难以回溯实验的出错原因，因为基质效应的严重程度已经覆盖了其他因素带来的误差了。

同样以最常见的负效应为例，作者认为：基质效应的抑制率建议不低于30%，如果负效应低于30%，建议是通过优化前处理净化参数或者延长色谱保留时间，以降低基质效应带来的影响。

还有一点值得注意的是：基质曲线定量只是校正基质效应对结果带来的影响，并不是校正了回收率，这个和标准加入法是不一样的。要考察一个方法是否可行，基质效应和回收率建议还是要分开讨论和校正的。

对于基质效应很强或者阳性且本底含量很高的样品，使用基质曲线定量还是比较麻烦的，这种情况可以参看作者的另一篇文章《揭秘质谱分析：基质效应的背后故事与破解之道》。

另外，由于不同的样品，基质差异很大，都配制基质曲线的话，需注意对仪器及色谱柱的污染，可延长洗脱程序的平行时间，并定期清洗离子源。但总体来说，作者还是更建议把前处理的优化做得更细，同时适当延长分析时间，这才是有效较少基质效应影响的有效方法。