AP-MALDI 原位质谱法高通量定量分析牛奶中的黄曲霉毒素

黄曲霉毒素是毒性最大的一类霉菌毒素，主要污染粮油食品、动植物食品、饲料等。目前已分离出20余种黄曲霉毒素衍生物，常见的有 B1、B2、G1、G2、M1、M2。其中以 AFB1 的毒性最大，致癌性最强。（发霉的食物一定不能吃）

奶牛吃了发霉的饲料（含黄曲霉毒素 B1），经体内代谢转化为黄曲霉毒素 M1（AFM1）。这就是牛奶中 AFM1 的来源。

AFM1 相对稳定，牛奶常见的消毒方法对其无可奈何。它的毒性仅次于 AFB1，主要表现在致癌性和致突变性。欧盟规定成人牛奶及奶制品中的 AFM1 含量不得超过 0.05 μg/kg（0.05 ppb）、婴幼儿奶制品中允许含量再降一半。 

传统方法如 TLC、ELISA、HPLC、LC-MS 等被广泛用于检测牛奶中的 AFM1。然而，由于大量快筛样本的增加，开发高通量定量方法至关重要。

原位质谱无需或仅需简单样品制备，可于常温常压下对样品直接原位采样，快速进行原位分析（参考：原位质谱测定玉米和牛奶中的黄曲霉毒素）。（点击链接）

AP-MALDI 大气压基质辅助激光解吸电离-原位质谱法同样能迎接超高通量分析需求的挑战，并能进一步绘制黄曲霉毒素及其代谢物的空间分布（质谱成像 MSI）。

Vishal Mahale 等人使用 AP-MALDI 建立了一套高通量、快速定量分析牛奶中 AFM1 的原位质谱方法，应用于食品监管机构和乳制品行业实验室。该法仅需简单的样品前处理即可获得可靠的定量分析结果。

实验方法：制备标准溶液和基质。牛奶样品用水稀释，免疫亲和柱（IAC）净化。AP-MALDI 离子源耦合 QTRAP 5500 串联质谱仪定量分析；同时，以 UHPLC-FLD 法进行了方法比较和结果验证。

AP-MALDI SRM 分析

每份样品的分析时间＜1分钟。在 SRM 检测模式中监测到 AFM1 在 273.1 u 和 229.2 u 的定性子离子峰。AP-MALDI SRM 方法在所选浓度范围内校准曲线有良好的线性关系，R²=0.99，样品回收率良好（97-106%）。

使用 UHPLC-FLD 方法对 AFM1 定量，验证了 AP-MALDI SRM 方法的有效性。与已有旧方法相比，新的 AP-MALDI SRM 方法具有良好的特异性和灵敏度，又可进行（传统方法达不到的）超高通量检测。

AP-MALDI 偶联 “选择离子反应监测（SRM）”可快速定量分析检测牛奶中的黄曲霉毒素 AFM1。与常规的耗时冗繁技术相比，新方案大大减少了分析时间，可用于大队列和多批次牛奶样品的筛查。

该法可靠、灵敏度高，符合国际监管机构要求，特异性与已验证的 LC-MS/MS 液质方法一致。同时，AP-MALDI SRM 也适于研究生物组织中黄曲霉毒素的空间定量成像，用于食品检测和临床研究。

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