Plant Cell | 海狸SA磁珠固定核酸探针，研究柑橘着色机制

BeaverBeads™ Streptavidin对生物素标记的CsCCD4b启动子片段与CsMYC2形成的探针-蛋白复合物进行下拉实验，研究了CsMPK6对CsMYC2蛋白功能的影响，助力研究茉莉酮酸盐（Jasmonates）调节β-柠檬黄素（β-citraurin）生物合成机制。

华中农业大学邓秀新教授团队在Plant Cell (IF:12.085) 发表文章Jasmonate activates a CsMPK6-CsMYC2 module that regulates the expression of β-citraurin biosynthetic genes and fruit coloration in orange (Citrus sinensis)。文章中用茉莉酮酸甲酯（MeJA）处理诱导了CsMYC2的表达，并且发现CsMPK6与CsMYC2的相互作用会降低CsMYC2的稳定性和DNA结合活性。从而得出结论茉莉酮类化合物可以通过激活CsMPK6-CsMYC2级联，诱导柑橘的β-柠檬素生物合成，从而影响果实着色。

为了研究CsMPK6对CsMYC2蛋白功能的影响，实验中使用BeaverBeads™ Streptavidin对探针-蛋白复合物（生物素标记的CsCCD4b和CsMYC2-MBP融合蛋白单独孵育/生物素标记的CsCCD4b与CsMYC2-MBP和CsMPK6-GST一起孵育）进行DNA下拉实验后使用免疫印迹进行分析。实验结果表明CsMPK6明显降低了CsMYC2蛋白的丰度，从而证明CsMPK6抑制了CsMYC2与CsCCD4b启动子的结合。

CsMPK6抑制了CsMYC2的CsCCD4b启动子结合活性