谁懂？！原来维生素的测定可以这么简单！

2023-06-16 13:12:40, 得泰仪器广州得泰仪器科技有限公司

维生素

维生素是人体生命活动不可缺少的营养物质，它们一般在动物和人体内不能合成或合成数量少，满足不了动物和人体的需要，必须依靠从食物中摄取。在食物中缺乏任何一种维生素，人和动物都会发生特有的缺乏症状，如缺乏维生素A、B和C时，可分别引起夜盲症、脚气病和坏血病等，严重时足以致命。维生素含量的高低，是评价农产品品质的重要指标之一。

维生素广泛存在于各种生物体中，其种类繁多，化学结构与功能各异。按其溶解性可分为脂溶性(VA、VD、VE、VK)和水溶性(VBl、VB2、VB6、VB12、VC)两大类。

维生素的分析测定是一项比较复杂的工作。其样品分析的一般程序是:首先用酸、碱或酶分解样品，使其中的维生素游离出来再用溶剂进行提取，提取后对样液进行分离提纯，最后用适当的方法进行定量等。维生素的前处理方法很多，选用方法时应根据样品的品种、类型、待测维生素的性质、含量以及干扰物质多少等因素来决定。

复杂的前处理过程往往需要智能高效的前处理仪器来进行，Detelogy参考GB 5009.82-2016 提供食品中维生素的前处理解决方案。

一、食品中维生素E的测定

1、植物油脂

称取2 g油样于25 mL的棕色容量瓶中，加入0.1g BHT，加入10 mL流动相于MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡溶解后，用流动相定容至刻度，摇匀。过滤膜，待进样。

注：流动相：正己烷+[叔丁基甲基醚-四氢呋喃-甲醇混合液(20+1+0.1)]=90+10，临用前配制。

2 、奶油、黄油

称取5 g样品于离心管中，加入0.1 g BHT 45℃水浴融化，加入5 g无水硫酸钠，MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋1 min，混匀，加入25 mL流动相后MultiVortex涡旋振荡提取，离心，将上清液完全转移至浓缩瓶中，并将其放入FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪上，于40℃水浴中浓缩至近干。用流动相定容10 mL，混匀。溶液过滤膜后，待测。

3、坚果、豆类、辣椒粉等干基植物样品

称取5 g 样品，用iQSE-02/06智能快速溶剂萃取仪提取其中的植物油脂，提取液于FlexiVap12/24全自动智能平行浓缩仪40℃水浴中氮吹浓缩至干，用10 mL流动相将油脂转移至25 mL容量瓶中，加入0.1g BHT，MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡溶解后，用流动相定容至刻度，摇匀。过滤膜，待进样。

iQSE-02/06萃取条件
萃取温度	105℃
萃取压力	1000 psi
加热时间	5 min
静态时间	10 min
冲洗体积	100%
N2吹扫时间	60 s
萃取溶剂	石油醚
静态萃取次数	3次

注：iQSE-02/06智能快速溶剂萃取仪可与FlexiVap-12/24全自动智能平行浓缩仪无缝衔接。

二、 食品中维生素 D的测定 液相色谱串联质谱法

1、皂化

称取2 g试样于50 mL具塞离心管中，加入100 μL维生素 D2-d3和维生素D3-d3混合内标溶液，（含淀粉样品需加入0.4 g淀粉酶、10 mL约40℃温水，60℃避光恒温振荡 30 min后，取出冷却）加入0.4 g 抗坏血酸、6 mL约40℃温水于MultiVortex涡旋1 min，加入12 mL乙醇MultiVortex涡旋混匀，再加入6 mL氢氧化钾溶液MultiVortex涡旋混匀后，80℃避光恒温水浴振荡30 min（如样品组织较为紧密，可每隔 5 min~10 min 取出MultiVortex涡旋0.5 min），取出放入冷水浴降温。

2、提取

向冷却后的皂化液中加入20 mL正己烷，MultiVortex涡旋提取3 min，离心后转移上层清液到50 mL离心管，加入25 mL水，轻微晃动30次，离心后取上层有机相备用。

3、净化

将样品提取液置于安装好硅胶固相萃取柱的iSPE-864全自动智能固相萃取仪中进行净化，收集洗脱液于FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪40℃下氮气吹干，加入1.0 mL甲醇，MultiVortex涡旋混匀，过有机滤膜供仪器测定。

iSPE-216/864固相萃取条件
步骤	溶剂	用量（mL）	流速(mL/min)
活化	乙酸乙酯	8	2
活化	正己烷	8	2
上样	样液	20	2
淋洗	乙酸乙酯：正己烷（5+95）	6	2
洗脱	乙酸乙酯：正己烷（15+85）	6	2

三、食品中维生素A和维生素E的测定

皂化

称取10 g固体试样或50 g液体试样于150 mL平底烧瓶中，固体试样需加入约30 mL温水，混匀，（若样品含淀粉时需加入1.0g淀粉酶， 60℃水浴避光恒温振荡30 min后，取出）再加1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT，混匀，加入30 mL无水乙醇，加入20 mL氢氧化钾溶液，混匀后于80℃恒温水浴震荡皂化30 min，冷却。

注:

1、皂化时间一般为30 min，如皂化液冷却后，液面有浮油，需要加入适量氢氧化钾溶液，并适当延长皂化时间。

2、使用的所有器皿不得含有氧化性物质；分液漏斗活塞玻璃表面不得涂油；处理过程应避免紫外光照，尽可能避光操作；提取过程应在通风柜中操作。

提取

将皂化液转移至分液漏斗中，加入50 mL石油醚-乙醚混合液，振荡萃取5 min，将下层溶液转移至另一分液漏斗中，加入50 mL的混合醚液再次萃取，合并醚层。

洗涤

用约100 mL水洗涤醚层，需重复 3 次，直至将醚层洗至中性，去除下层水相。

浓缩

将洗涤后的醚层完全转移至FlexiVap-12全自动智能平行浓缩仪上，于40℃水浴中氮吹浓缩至近干。用甲醇分次将蒸发瓶中残留物溶解并转移至10 mL 容量瓶中，定容至刻度。溶液过有机相滤膜后供高效液相色谱测定。

四、食品中维生素 D的测定高效液相色谱法

皂化

称取10 g固体试样或 50 g液体样品于150 mL平底烧瓶中，固体试样需加入30 mL温水，加入1.00 mL内标使用溶液(如测定维生素D2，用维生素D3作内标；如测定维生素D3，用维生素D2作内标，含淀粉样品需加入1g淀粉酶进行酶解)，再加入1.0 g抗坏血酸和0.1 g BHT混匀。加入30 mL无水乙醇，加入20 mL氢氧化钾液，边加边振摇，混匀后于恒温磁力搅拌器上80℃回流皂化30 min，皂化后立即用冷水冷却至室温。

后续步骤同食品中维生素A和维生素E的测定方法

Detelogy优选仪器

MultiVortex多样品涡旋混合器

⚪ 高通量，配置多种规格样品管

⚪ 高转速，应对各种难溶样品

⚪ 可预存12种涡旋程序

iQSE-06智能快速溶剂萃取仪

⚪ 6个通道并联使用，每个通道可独立启停

⚪ 萃取池自动密封，运行开始后自动升温升压

⚪ 图形化界面全方位监控萃取流程

iSPE-864全自动智能固相萃取仪

⚪ 八通道，可批量处理64个样品

⚪ 采用先进的柱塞杆密封过柱技术，支持串柱功能

⚪ 主机与智能终端一体化设计，无需外接电脑

FlexiVap-12/24 全自动智能平行浓缩仪

⚪ 实验过程中可随时启停增减样品

⚪ 氮吹角度自动调节（0-90°），先斜吹后直吹

⚪ 各个通道均可独立控制，自动定量浓缩1 mL或0.5 mL

FV32Plus全自动高通量智能平行浓缩仪

⚪ 兼容针追随式氮吹和涡旋式氮吹针。

⚪ 三面水浴可视窗具备多色照明功能，智能快插排水口。

⚪ 各个通道均可独立控制，自动定量浓缩1 mL或0.5 mL

关于得泰仪器

广州得泰仪器科技有限公司（Detelogy）是一家致力为全球实验室用户提供更智能更高效的智能样品前处理设备、智能分析仪器和智能自动平台设备等的高新技术企业。

目前已向全球用户推出了智能氮吹仪、全自动智能氮吹仪、全自动智能平行浓缩仪、智能快速溶剂萃取仪、高通量智能动植物研磨均质仪、多样品均质仪、多样品涡旋混合器、全自动智能固相萃取仪、智能石墨电热板、智能石墨消解仪等智能样品前处理设备和优选样品前处理整体解决方案。我们始终致力于在实验室检测领域，践行人工智能实现美好生活。销售网络遍布全国并远销海外，已为众多用户提供了优质的智能实验室产品及全方位的服务。

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