2022-11-16 16:44:33, 月旭科技 月旭科技(上海)股份有限公司
WELCH
新品上市
试用申请
(图片来源:包图网)
维生素B12,又称钴胺素,是人体必须的维生素之一,但人体对其需求量相对较少,每天仅需3μg即可满足,维生素B12是唯一的一种需要肠道分泌物帮助才能被吸收的维生素,可以参与制造骨髓红细胞,防止恶行贫血,防止大脑神经受到破坏。但过多量的维生素B12可能导致神经损害、加重白血病或者引起过敏性疾病等问题。国家标准中规定的维生素B12含量在婴幼儿配方食品中为8.0μg/kg:儿童用乳粉为10~30μg/kg:孕产妇用乳粉为10~66μg/kg。
为保障广大群众食品安全,月旭科技最新推出Welchrom® 维生素B12亲和柱,广泛地应用于饮料、牛奶和奶粉,饮料等样品的提取,对提高食品的质量和安全性起到十分重要的作用。完全符合GB 5009.285-2022食品中维生素B12的测定等国家食品安全标准。
(图片来源:包图网)
原理
(图片来源:包图网)
Welchrom® 维生素B12免疫亲和柱测定的基础是抗原抗体反应,维生素B12单克隆抗体连接在柱内凝胶上,样品中的维生素B12经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢的通过维生素B12免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内,维生素B12与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他物质。用甲醇洗脱维生素B12,然后注入到分析仪器中用于检测。
净化步骤
(图片来源:包图网)
01
取10g试样于50mL离心管中,加入30mL乙酸钠缓冲液,用氢氧化钠溶液调pH至4.0,加入0.2g胃蛋白酶、0.05g淀粉酶和2mL氰化钾溶液,充分混合。将样品溶液放入水浴恒温振荡器,在37℃,振荡酶解30min。
02
酶解后转入100℃水浴中,保持30min,取出冷却至室温。将样品溶液转移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。
03
移取上述溶液40mL至50mL离心管中,在10000r/min下离心10min,取上清液用玻璃纤维滤纸过滤后备用。
04
将免疫亲和柱连接于10.0mL玻璃注射器下。准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃注射器。
05
将空气压力泵与玻璃注射器连接,调节压力使溶液以约1滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至2~3mL空气通过柱体。
06
以10.0mL的PBS溶液和去离子水依次淋洗柱子1次,流速约为1-2滴/S,弃去全部流出液,并使2mL~3mL空气通过柱体。
07
准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速为1滴/S,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。
色谱条件
色谱柱:月旭UItimate® XB-C18(4.6×150mm,3μm)。
流动相:
时间(min)
A(0.04%三氟乙酸)
B(乙腈)
0901039010150
100
15.1
9010209010
柱温:40℃;
紫外检测器:361nm;
流速:0.8mL/min;
进样量:100μL。
流动相配置
A(0.04%三氟乙酸):移取200μL三氟乙酸,加入500mL水,混匀。
B(乙腈):色谱级乙腈,抽滤。
谱图
名称
峰面积
加标浓度
ng/mL
浓度
ng/mL
回收率
%
维生素
B12
8.20
60
56.48
94.14
产品信息
货号名称规格
01140-
16032
Welchrom®
维生素B12
免疫亲和柱
Vitamin B12
IAC 3mL,15/pk
00201-
21041
分析柱
Ultimate®
XB-C18,3μm,
4.6×150mm
00824-
33001
泵流操作架
泵流操作架
(含空气泵)-8位
00814-
01010
乙腈
WelPure,乙腈,
CAS No.:75-05-8,
HPLC,4L,危化品
00814-
01008
甲醇
WelPure,甲醇,
CAS No.:67-56-1,
HPLC,4L,危化品
如果您想了解更多内容,欢迎联系月旭科技销售人员或拨打400-810-6969服务热线,我们将竭诚为您服务。
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