2022-10-10 21:07:26 三耀精细化工品销售(北京)有限公司
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本期推送主要介绍2020版中国药典中强力定眩胶囊的天麻素含量测定。
实验中因为基质中的杂质较为复杂,天麻素较难和前后杂质达成分离,且由于药典中的流动相条件水相比例较高,所以本项目对色谱柱的高水相耐性要求较高。
20版药典强力定眩胶囊含量测定项下要求使用C18色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸(3:97)溶液为流动相。
由于国标条件水相比例较高,因此我们使用耐水型CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱,在药典方法下进行了分析,结果如下图所示:
HPLC Conditions :
色谱柱:CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6 mm i.d.×250 mm
流动相:乙腈/0.05%磷酸=3/97
流 速:0.8 mL / min
温 度:45°C
检 测:PDA 220 nm
浓 度:客户提供
进样量:5 µL
结果中,天麻素和前后杂质分离度分别为2.224和1.758,能够实现基线分离要求,理论塔板数20544,满足药典不低于5000的要求。
该项目分析中,虽然药典对于分析柱温没有规定,但柱温对分离有一定影响,下图为柱温35摄氏度时分析结果,可见天麻素前后杂质未得到基线分离,而柱温较高时,有利于天麻素前后杂质的分离。
HPLC Conditions :
色谱柱:CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6 mm i.d.×250 mm
流动相:乙腈/0.05%磷酸=3/97
流 速:0.8 mL / min
温 度:35°C
检 测:PDA 220 nm
浓 度:客户提供
进样量:5 µL
另外,该项目分析中,结果受到有机相比例变化影响大,在不同人员配置流动相时,保留时间有约1 min的偏差,同时在分离度上也可能会出现偏差,对比结果如下图所示。在实际分析中若出现问题,可以考虑将有机相比例进行±1%的微调。由于该分析方法为等度方法,有部分疏水性杂质不易洗脱,建议在日常分析后,使用高比例有机相对色谱柱进行冲洗,也可考虑使用预柱。
综上所述,使用CAPCELL PAK C18 AQ S5; 4.6 mm i.d.×250 mm色谱柱能够完成强力定眩胶囊20版药典含量测定分析,符合药典规定。
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