靶向神经母细胞瘤AURKA降解剂开发

2022-09-27 17:39:41 ProteinSimple

比利时根特大学科学家研究降解神经母细胞瘤（Neuroblastoma, NB）中极光激酶A（Aurora Kinase A，AURKA）靶点，AUKAR在有丝分裂中具有催化功能，同时稳定关键癌蛋白MYCN，是公认的NB药物靶点。

作者通过探索不同接头子Linker长度，及4和5位作为沙利度胺出口载体的MK-5108衍生的PROTAC构效关系。

结果表明，PROTAC SK2188可诱导AURKA最高效的降解，24h条件下DC50<10 nM，1h时Dmax 98%和24h时Dmax 80%。

在细胞增殖药物筛选实验和患者来源类器官中，SK2188作用效果显著优于母体抑制剂MK-5108。在NGP神经母细胞瘤细胞系水平实验中，会诱导伴随的MYCN降解、DNA损伤水平和细胞凋亡。

将PEG连接子的结合位点设计到沙利度胺5位，同时连接子缩短到2个PEG单位，获得的PROTAC分子能高效降解AURKA。

Digital Western（Simple Western）定量检测AURKA降解水平变化

上图数据结果表明，SK2188可实现有效且快速的AURKA靶蛋白降解。

采用毛细管Digital Western（即Simple Western）评估NGP细胞水平PROTAC作用效应，采用10、100和1000 nM化合物处理24小时候，监测AURKA倍数水平变化。除了4位点短的2 PEG单元SK3250外，其余所有PROTACs都诱导有效的剂量依赖性AURKA降解。

与其他研究相一致，使用母体抑制剂MK-5108治疗导致AURKA蛋白水平增加近2倍，基于alisertib设计JB170表现出较弱的降解活性。进一步验证说明，蛋白酶体抑制剂处理后，可防止SK2188降解活动，AURKA降解是由Cereblon介导的蛋白酶体依赖性作用机制。

AURKA抑制剂是神经母细胞瘤治疗模式活跃的领域，然而经典抑制剂治疗导致AURKA表达上调，导致临床实践中潜在治疗抵抗相关，蛋白降解剂是一个有潜力的方向。

Digital Western可在细胞水平和类器官模型等不同层面评估AURKA蛋白降解情况，是此靶点蛋白降解剂开发的有力工具。