【乳品小课堂】碱性磷酸酶与乳过氧化物酶篇：检测中的注意事项

由于人唾液中含有一定量的碱性磷酸酶，在检测过程中应戴口罩，避免唾液接触到待检测样本。

 碱性磷酸酶化学发光底物在酶的催化下分解并发出很强的光信号，其发光强度取决于ALP的浓度，但当样品溶液中含有EDTA、氟离子、柠檬酸盐等ALP的抑制剂时，会导致测定结果失准的情况。

除了牛奶内源ALP，牛奶中还存在微生物ALP，当进行巴氏杀菌乳中ALP检测时，有可能因为微生物源ALP或ALP复活而产生假阳性现象。

目前传统的检测方法无法直接区分内源和微生物源的ALP，若巴氏杀菌乳ALP水平较高，取一部分样品重新巴氏杀菌处理后ALP水平没有明显降低，这可能是微生物ALP的存在影响了最终的检测结果，这主要是由于微生物ALP耐热性能要高于生鲜乳中存在的ALP；对于ALP的复活造成的假阳性结果，在待确认的阳性样品中加入含镁离子的溶液，经过相应温度和时间的培养，再次检测ALP活性，当测定结果不发生变化或者增强时，则可认为该阳性结果为复性造成的假阳性结果。

选择均匀、新鲜的样本，提取后的样本尽量在2小时内检测，放置过久可能会导致检测结果偏低。

样本提取离心后应吸取溶液中间层进行检测，切勿取到上层脂质和下层沉淀，避免样本过于浑浊影响检测结果吸光度。

由于样本基质的差异性，不同的奶样提取后，样本溶液中的成分存在差异，其中有些成分会影响乳过氧化物酶的酶活力。

可以通过增加稀释倍数或用待检阴性样本的提取液作为标准品稀释液，保证干扰一致性，来消除样本基质的干扰，得到较准确的检测结果。