2022-08-29 18:08:16, 食品安全的守护者 山东美正生物科技有限公司
检测方法概述
碱性磷酸酶(ALP)和乳过氧化物酶(LPO)属于酶类,具有高度的专一催化活性,可通过测定其相应底物或产物的光学反应来确定酶活性。
ALP检测方法
90年代以前,ALP 活性的检测方法只有比色法,检测限最低约为500 mU/L,该值是早期欧盟和美国判断巴氏杀菌乳ALP阴性或阳性的标准。2004年,中国农业农村部发布的NY/T 801-2004 《生鲜牛乳及其制品中碱性磷酸酶活度的测定》标准中,规定了苯酚法来进行生鲜牛乳及乳制品中ALP的活度测定。
近年来,新方法层出不穷,如,荧光法、发光法、电化学法等,与比色法相比,这些方法在灵敏度、特异性、稳定性及检测速度等方面都有了很大提高。
判定标准时间线
2003年,随着荧光法和发光法的发展,美国国家州际奶业运输委员会(NCIMS)对巴氏杀菌奶条例(PMO)进行了修改,判定标准调整至350mU/L。
2006年,欧盟(EU)实验室工作组也推荐采用350mU/L作为判定标准,同时还设定了一个目标值100mU/L,如果乳品厂生产的巴氏奶的ALP活性超过此水平,就要对该加工厂进行安全审查。
2021年,中国农业农村部部发布NY/T 3799-2020 《生乳及其制品中碱性磷酸酶活性的测定 发光法》中规定,若样品中ALP活性≥350mU/L,则样品疑似阳性,需通过试验确认是否存在耐热型碱性磷酸酶或复活型碱性磷酸酶。
LPO检测方法
目前,国内外有关LPO检测方法的研究较多,大多是基于颜色反应,利用酶促反应原理,借助分光光度计测定酶活大小。
常用的显色剂有2,2''-连氢基-双(3-乙基苯并嚷吡咯咻-6-磺酸)、二氨盐(ABTS)、3,3'',5,5'' -四甲基联苯胺(TMB)、愈创木酚、苯胺及邻苯二胺等。
中国食品科学技术学会发布的T/CIFST 008-2022 《乳中乳过氧化物酶活性的测定 比色法》中,使用TMB作为底物,通过比色法测定乳中LPO的活性,规定在温度20 ℃-30℃、pH 6.5-7.2条件下,每分钟催化氧化1μmol底物TMB所需要的LPO的量表述为1个乳过氧化物酶单位,即1U。
随着乳企对方法实用性、便捷性要求的提高,商品化酶检测试剂盒逐渐被乳企企业和相关检测单位接受,成为目前市场主流应用产品。
上篇我们讲到,碱性磷酸酶的“阴性”指标从一定程度上标志着乳制品巴氏杀菌的成功;乳过氧化物酶活性检测结果良好,意味着加工过程中不存在过度热加工、热处理从而使得营养成分保留较好。
ALP和LPO就像驻守在乳品安全和营养健康的天平两端,企业要控制食品安全,就要保证ALP数值在阴性范围内;也要尽力保留LPO活性,保证乳制品营养水平。
参考文献:
[1] 张昊. 乳及乳制品中碱性磷酸酶和乳过氧化物酶活性检测方法的评估及应用[D].兰州大学, 2019.
[2] 申军士,王加启,卜登攀,魏宏阳,兰欣怡. 乳中碱性磷酸酶活性测定方法研究进展[J].中国乳品工业, 2009,37(06),31-34_
[3] 辛岩,车红霞. 乳过氧化物酶检测方法的研究进展[J] 农产品加工,2015,(11),69-72.
06-18 TESCAN中国
解决临床创新“卡脖子”难题,丹纳赫重磅推出医院创新转化解决方案!06-18
徕卡精准空间生物学解决方案 第三弹06-18 郑晓业、童昕
618 嗨购一起“徕” | 网上商城活动来袭!06-18 徕卡显微系统
【培训活动】显微镜成像高阶培训系列(一) 共聚焦多维度成像技术解决方案06-18 徕卡显微系统
【展会】第十五届中国医师协会骨科医师年会06-18 徕卡显微系统
【直播预告】第十届电子显微学网络会议06-18 徕卡显微系统
【案例研究】双视野光片显微镜,适用于类器官及胚胎06-18 徕卡显微系统
议程确定|第四届锂离子电池热测试主题研讨会06-18
文献解读|安徽理工大学马衍坤教授团队《煤炭学报》:震动载荷多次作用下烟煤孔裂隙结构演化特征试验研究06-18 纽迈分析
中国的新质生产力正在服务全球市场!GE医疗北京基地CT交付量达3.5万台/套06-17
兰格ACHEMA 2024展会回顾:探寻精密流体传输市场新机遇06-17
宝英科技推出VOCs治理设施精细化管理实施方案,助力重点行业企业绿色升级06-17 宝英科技
赛默飞X先锋“肽”势:多肽药物研发与创新研讨会06-17
一省检验检测行业营收突破160亿元!06-17
仪器租赁 | 沃特世 液质联用,月租金52000元起06-17
不同行业实验室“以旧换新”,涉及哪些仪器设备?06-17
目标!检验机构总营收超100亿!06-16
一张“A4纸”售价高达万元,这家第三方检测公司是怎么做到的?06-15
GLMY创想仪器丨参加东北地区铸造年会06-15 国产精密仪器厂家