说出您的故事 | 癌症机制研究--中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所

2022-08-11 01:58:46, 秦静怡 ProteinSimple


秦静怡

实验室管理员/助理研究员

中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所

全自动毛细管Digital Western优势在于无需跑转膜,减少实验步骤,避免样品损失;有效提高检测结果的精确性和重复性;节约珍贵样品和抗体,快速高效,检测灵敏度高,实验完成后自动给出详尽的分析数据,可对结果自动进行精确的定量分析,最重要的是避免了人为误差。用仪器代替繁复的人为手工操作,这是全自动毛细管Digital Western的WES系统带给我们最大的意义和解放。

近年来,在上皮性卵巢癌(Epithelial卵巢癌,EOC)中发现了KIAA1199的异常表达。 然而,KIAA1199的抗卵巢癌机制尚不清楚。 在我们的研究中,我们阐明了KIAA1199通过激活IL-6/STAT3通路对EOC细胞高级生物学行为的影响。免疫组化证实KIAA1199在卵巢交界性及恶性上皮性肿瘤中高表达。回顾性分析发现KIAA1199低表达的EOC患者5年生存率明显高于高表达的EOC患者。机制上采用IL-6刺激EOC细胞,刺激后KIAA1199、STAT3和p-STAT3表达增加。 这些结果表明KIAA1199可能被IL6/STAT3通路转录激活,从而加速EOC的恶化。KIAA1199也可作为预后不良的因素和治疗的潜在靶点。


用WES(全自动毛细管Digital Western型号之一)研究KIAA1199沉默对EOC细胞迁移和侵袭的影响:

Western blot检测不同EOC细胞系HO-8910、A2780、SK-OV3和OVCAR-3的KIAA1199蛋白水平,探讨KIAA1199的异常表达是否与EOC的恶性表型有关。结果显示HO8910和CAOV-3细胞系KIAA1199蛋白水平低于A2780和OVCAR-3。


所谓工欲善其事必先利其器,在Western blot的实验中, WES切实的解决了,用一支样品完成分离、捕获、固定,免疫检测和定量分析的问题。上样环节,传统的Western,用蛋白定量,还是不可避免的会有上样量多少的差异,对于初学者来讲,第一步上样就是一很大的问题,WES通过自动进行一抗二抗孵育和化学发光检测,自动进行结果分析,有效提高检测结果的精确性和重复性,单个样品上样体积3-5ul,节约珍贵样品和抗体。电泳时,传统的Western,对于电压、胶槽的使用也会出现一些例如笑脸,哭脸的图谱,造成数据不准的现象。在转膜环节,不论是湿法,半干法转膜,都不可避免的有信号损失,即使是最有经验的实验者,在这个环节,也不可避免的会出现胶损坏的问题,再次拼接,也会出现条带不准确的现象。传统的Western Blot,在染了样本的之后,需要清洗,再染内参,耗时耗力,同时不可避免的造成信噪比高,这是我们最不愿意看到的现象。


全自动毛细管Digital Western优势在于无需跑转膜,减少实验步骤,避免样品损失;有效提高检测结果的精确性和重复性;节约珍贵样品和抗体,快速高效,检测灵敏度高,实验完成后自动给出详尽的分析数据,可对结果自动进行精确的定量分析,最重要的是避免了人为误差。用仪器代替繁复的人为手工操作,这是全自动毛细管Digital Western的WES系统带给我们最大的意义和解放。


癌症治疗虽然还有很长的路要走,但是我们在探索领域、技术手段上的不断发展和创新,在多学科、多领域上的协同发展,会不断的促进治疗领域的进步。


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