科普｜精子还能碎了？！——揭秘流式细胞术在生殖医学中的应用

传统观念认为“流产都是女人的事”。但是，受精卵是由精子跟卵子结合形成的，如果男方精子质量不好，受精卵质量就不好，从而导致胚胎发育不良而使女方流产。

目前，对精液质量的常规检查主要包括对精液量、精子浓度、精子活率、前向运动精子总数和百分率（PR）以及精子形态的检查等，但以上常规检查已不能满足临床需要，这个时候就要引入一个新的指标——精子DNA 碎片率（DFI）。

生殖检验项目几乎涉及医学检验的各个方面，如生化、免疫、微生物、分子遗传等。那么流式细胞术可以为生殖检验提供什么检测项目呢？今天要分享的是两个专家共识，涉及精子检测和生殖免疫分析。

精子碎片流式检测与临床应用专家共识

临床评估精子功能对妊娠结局和辅助生殖结果具有较高的预测价值，对于接受辅助生殖技术的患者，精子DNA碎片(SDF)已经成为一种新的风险分层生物标志物。精子染色质结构分析( SCSA) 试验利用吖啶橙(AO)检测精子DNA链的断裂碎片(DFI)，以及缺乏正常的组蛋白与鱼精蛋白交换为特征的异常高DNA染色性（HDS)精子。由于精液中每个精子在其 DNA 完整性方面都是独特的和可变的，通过流式细胞技术检测同时大量细胞，可以准确评估完整性，提高了SDF试验的可靠性。

精子DNA片段( SDF) 检测在临床实践应用指导图

此外，流式细胞术还可以进行精子功能、损伤等分析：包括顶体完整率、顶体酶活性、自发和诱发顶体反应率、精子膜完整性、精子乳酸脱氢酶C4活性、线粒体膜电位(MMP) 、精子活性氧( ROS) 、膜糖被等，评估和监测精子形态、功能、损伤, 以及各种体外处理技术和低温贮藏对精子结构的影响，为优生优育提供检测平台。

复发性流产诊治的专家共识

复发性流产（RSA）的病因十分复杂，主要包括遗传因素、解剖因素、内分泌因素、感染因素、免疫功能异常、血栓前状态、孕妇的全身性疾病及环境因素等。

生殖免疫研究表明，RSA的病因约半数以上与免疫功能紊乱有关。不同因素导致流产的免疫病理变化也不尽相同，可将免疫性流产分为自身免疫型RSA及同种免疫型RSA两种。其中同种免疫型RSA包括：（1）固有免疫紊乱：包括自然杀伤细胞数量及活性升高、巨噬细胞功能异常、树突状细胞功能异常、补体系统异常等。（2）获得性免疫紊乱：包括封闭抗体缺乏、T、B淋巴细胞异常、辅助性T淋巴细胞Th1/Th2细胞因子异常等。

T细胞亚群在妊娠不同时期中的免疫作用

在植入阶段，Th1 细胞在蜕膜处浸润，并通过参与组织重塑和血管生成来调节滋养层的侵袭。Th17细胞参与中性粒细胞浸润和诱导针对子宫内细胞外微生物的保护性免疫。Th22细胞还保护滋养层细胞免受病原体和宫内感染的炎症免疫反应。Treg和Th2细胞抑制过度的Th1和Th17 免疫。

植入阶段结束时，Th2和Th9细胞成为主导并促进同种异体移植物耐受。Tfh细胞通常在妊娠晚期富集，有利于体液免疫和平衡 Th1/Th2 免疫反应。

流式细胞术可以对外周血及组织微环境的免疫细胞、细胞因子等成分进行检测，评估封闭抗体缺乏，从而帮助临床鉴别RSA的病因是否与同种免疫紊乱有关，并指导进一步的治疗和监测。

参考文献：

• 精子碎片实验室检测与临床应用专家共识编写组 ,张宁. 精子碎片实验室检测与临床应用专家共识——基于流式细胞精子染色质结构分析[J]. 中华男科学杂志,2022,28(02):173-182.

• 中华医学会妇产科学分会产科学组. 复发性流产诊治的专家共识[J]. 中华妇产科杂志,2016(1):3-9.

• 自然流产诊治中国专家共识编写组. 自然流产诊治中国专家共识(2020年版)[J]. 中国实用妇科与产科杂志,2020,36(11):1082-1090.

• Wang W, Sung N, Gilman-Sachs A, Kwak-Kim J. T Helper (Th) Cell Profiles in Pregnancy and Recurrent Pregnancy Losses: Th1/Th2/Th9/Th17/Th22/Tfh Cells. Front Immunol. 2020 Aug 18;11:2025.