No.217｜寡核苷酸的分析利器—CAPCELL PAK ADME-HR

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ADME-HR以其独特的金刚烷键合相，展现出高极性与适当疏水性的完美组合，以高比例有机相/低比例水相为流动相，即可实现强极性化合物(如寡核苷酸)在色谱柱上保留和分离，并且，流动相中高比例有机相, 更有利于提高ESI-MS的灵敏度。

CAPCELL PAK ADME-HR在反相模式下分析高极性化合物时更为有效，如下图所示高极性核酸相关化合物的保留率，ADME(蓝色柱状)较ODS(黄色柱状)的平均保留时间提升到2-3倍。

胸腺嘧啶、嘧啶5位取代的5-羟甲基尿嘧啶、5-甲酰基尿嘧啶、尿嘧啶-5-羧酸以及其他嘧啶类化合物均为极性非常强的化合物。本实验使用可以在100%水系流动相中使用的CAPCELL PAK ADME-HR S5（4.6 mm i.d. x 250 mm）色谱柱，得到了上述化合物的良好保留与分离。

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK ADME-HR S5 ;

             4.6 mm i.d. x 250 mm

流动相：20 mmol/L NaH2PO4 (adjusted

             at pH 2 with phosphoric acid)

流   速：1.0 mL/min

温   度：40 ℃

检测器：UV 210 nm

进样量：5 μL

在人体的核苷酸代谢中，核糖部分解离后，游离的核酸碱基最终代谢成为尿酸，在肾脏中进行排泄。在小鼠等哺乳类动物中，尿酸中的嘌呤骨架开环形成尿囊素。本实验使用能够在100%水系流动相中使用的CAPCELL PAK ADME-HR S5（4.6 mm i.d. x 150 mm）色谱柱，对高极性化合物尿囊素、乳清酸、尿酸、胞嘧啶、尿嘧啶、次黄嘌呤、鸟嘌呤和尿苷进行了同时分析。

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK ADME-HR S5;

             4.6 mmi.d. x 250 mm

流动相：10 mmol/L HCOONH4

流   速：1.0 mL/min

温   度：40 ℃

检测器：UV 210 nm

进样量：5 μL

核酸碱基及核苷酸均为极性很高的化合物。本实验使用CAPCELL PAK ADME-HR S3（2.1 mm i.d. x 150 mm）色谱柱对7种组分进行了分析。

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK ADME-HR S3;

             2.1 mmi.d. x 150 mm

流动相：A) 10 mmol/L HCOONH4,

             B) CH3CN

             B 1%(0 min)->1%(1 min)

              ->40%(15 min)->1%(15.1 min)

流   速：0.2 mL/min

温   度：40 ℃

检测器：UV 254 nm

进样量：2 μL

以核苷酸的分解产物作为指标是鱼类鲜度的一种判定方法。本实验使用适合于高极性化合物分析的CAPCELL PAK ADME-HR S5（4.6 mm i.d. x 150 mm）色谱柱，对核酸相关物质（ATP相关物质）进行了共同分析。

5. 次黄嘌呤

【色谱条件】

色谱柱：CAPCELL PAK ADME-HR S5; 4.6 mmi.d. x 150 mm

流动相：25 mmol/L Phosphate buffer

流  速：1.0 mL/min

温  度：40 ℃

检测器：UV 260 nm

进样量：10 μL