2023-09-19 10:48:55, 安捷伦细胞分析 安捷伦细胞分析事业部(BioTek)
想象一下,您正在读一本非常精彩的书,但由于某种原因却无法读完它。也许您把这本书弄丢了,也许您读到最精彩的部分却发现有人撕掉了关键章节。至少这是令人沮丧的,但也许您可以再获得一本。
Syed Ali,科学家
在生物翻译(即 mRNA 被核糖体“读取”以生成蛋白质)的过程中,有时也会发生类似的情况。如果 mRNA 含有位置错误的终止密码子,翻译会过早停止,而无法产生某种功能性蛋白质(也许是某种必需蛋白质)。这种情况的后果可能远远不止令人沮丧;缺乏相应蛋白质可能会导致严重的疾病。
科学家 Syed Ali 及其团队希望能确保细胞“讲述完整的故事”。
Ali 解释道:“我们的研究始于强大的信息学工具,这些工具帮助我们鉴别靶基因。然后,我们合成被称为反义寡核苷酸或 ASO 的小 RNA 片段,用于调节靶蛋白的表达。我们使用 qPCR 和蛋白质印迹法等工具仔细研究这些 ASO,以确保它们产生预期效果。”
尽管产生目标效果是一个好征兆,但它并非最终目标。ASO 必须作为治疗药物发挥作用;也就是说,它必须能够缓解疾病状态并改善患者的健康。
Ali 继续说道:“此时,生物学成为我们的主要关注点。我们仔细考察候选 ASO 的功能活性,以了解它如何影响基础代谢等关键细胞过程。这正是 Seahorse XF 发挥至关重要作用的地方 ― 我们仔细研究线粒体生物能量代谢和糖酵解通路,作为衡量 ASO 对总体细胞健康状况影响的重要指标。”
Ali 及其团队开始采用 Seahorse XF,因为他们对相关文献引用的梳理表明,Seahorse XF 是用于这些目的的“金标准”平台。特别受关注的是细胞线粒体压力测试,该测试为 Ali 及其团队提供了急需的关于基础呼吸、ATP 生成、最大呼吸和备用呼吸能力的信息。Ali 说道:“大多数已发表的研究将这四个参数报告为一种广泛而详细地了解细胞功能的方式。首次应用 Seahorse XF 时,我们很快就看到了结果,证实它正是我们需要的技术 ― 我们能够重现其他研究组报道的结果,从而使我们的研究与文献报道的研究保持一致。当我们取得这一进展时,真正对这项技术产生了信赖。”
Ali 还报道称,很少有研究组使用 Seahorse XF 平台来研究治疗性 ASO 的功效,这促使他们探索新的途径来使用该平台所提供的数据指导其研究。
他说道:“随着我们将研究推向新的方向,我们越来越依赖Seahorse XF。例如,我们必须开发自己的方法,将 ASO 引入体外系统中,而 Seahorse 技术已成为这些工作中不可或缺的一部分。获取有关 ATP 生成等事件的可靠信息对我们的研究非常重要,并且我们得到的结果应该是一致的。如果数据聚类良好,就可以帮助我们确定是否正在使用值得信任的东西。”
除 Seahorse XF 所提供的关键代谢见解以外,Ali 从实用的角度表达了对该平台的赞赏。他解释道:“我必须开发一种基于图像的检测方法对 96 孔板中的细胞进行计数,这是一个挑战。我们现在拥有高内涵成像仪,它使我们能够轻松将Seahorse 板放入其中进行细胞计数,操作非常方便。此外,Seahorse 软件具有用户友好的界面,使我们能够将结果直接导出到 Excel 中,从而轻松地以易于使用的形式提取数据,这点非常有用。”
他继续说道:“在我们行业内,尤其是对于像我们这样的小型初创公司来说,时间至关重要。什么有效,我们就用什么。只要 Seahorse XF 继续提供金标准结果,它就会在我们的实验室中占有一席之地。”
安捷伦 Seahorse XF Pro
安捷伦 Seahorse XF Pro 专为制药行业开发适用范围更广,具有更高的灵敏度和精度,以及先进的实验设计和分析工具。
仅供科研使用,不用于临床诊断用途。
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