技术应用 | 使用Kinetex®5 µm C18对硫酸羟氯喹片中的羟氯喹和氯喹实现可靠分离

概述

本应用针对USP药典条件下对硫酸羟氯喹片内的硫酸羟氯喹及相关杂质氯喹进行进行分析时，分离中类似L1（C18）固定相的两种颗粒形态进行了对比。本应用介绍了根据USP通则第<621>章中规定的允许调整范围，相对于药典中的初始色谱柱和条件所可以实现的方法改进。

药典：硫酸羟氯喹

pK _a ：9.67

LogP：3.87

USP药典：硫酸羟氯喹片分析

标准储备溶液	将1.0 mg/mL USP硫酸羟氯喹RS溶于稀释剂
标准溶液	将取自标准储备溶液的0.05 mg/mL的USP硫酸羟氯喹RS溶于流动相
系统适用性	将1.0mg/mL的磷酸氯喹溶于甲醇
储备溶液	将5.0mL的系统适用性储备溶液转移至100-mL量瓶中，添加5.0mL的标准储备溶液，然后用流动相稀释至刻度。
系统适用性	甲醇：水混合物（1:1）

溶液

规格	方法1：250 x 4.6 mm 方法2：250 x 4.6 mm
固定相	方法1：全多孔5 µm C18 方法2：Kinetex 5 µm C18
温度	26°C
流动相（预混）	A=甲醇、乙腈、水和磷酸（100:100:800:2）。混合并加入96mg戊烷磺酸钠至合成溶液，然后过滤流动相
等度	等度：（100:100:800:2，甲醇:乙腈:水:磷酸）
流速	总运行时间：20min
检测器	1.0mL/min
进样量	UV@254nm
相对于布洛芬的保留度* 戊内苯酮	约 0.8

系统适用性 - 系统适用性溶液和标准溶液

样品：标准溶液和系统适用性溶液

USP拖尾系数，<621>色谱分析**

对称系数（As）：也称为拖尾系数

计算公式：A_s = W_0.05 /2f

其中W_0.05 为峰在5%高度处的宽度，而f是峰最高点距离峰前沿的距离，在离基线5%的峰高度处测量该距离。

** 美国药典40国家处方集35（USP 40-NF 35，United States Pharmacopeial Convention, Rockville, Maryland, 2017）中的通则第<621>章“色谱柱分析”，第6页。

为了满足系统适用性进行的调整

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* 可选（针对全多孔颗粒的粒径调整），可以使用其它L/dp比率，前提是理论塔板（N）数量在-25%到+50%的范围内。

** 在既定色谱柱内径条件下保持体积流速。

允许的色谱柱调整：L/dp比率-25%到+50%

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方法小结和对比