【热点应用】赛默飞推出高效液相色谱法同时测定红细胞保存液中腺嘌呤和枸橼酸的解决方案

科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技（以下简称：赛默飞）近日推出高效液相色谱法同时测定红细胞保存液中腺嘌呤和枸橼酸的解决方案。

腺嘌呤是核酸的组成部分，在体内参与RNA和DNA合成，在实际应用中，腺嘌呤可提高血液在4℃贮存期间的活性水平，红细胞依赖腺嘌呤转变为磷酸腺苷(AMP)并进一步磷酸化生成ATP为红细胞新陈代谢活力提供高能化合物来源，大大延长血液在4℃的保存时间。

枸橼酸又名柠檬酸,其中，柠檬酸钠是目前最重要的柠檬酸盐，鉴于其安全无毒性，生物降解性，与金属离子络合能力较好,且具有良好的pH调节，溶解性及缓冲性能，使得其具有十分广泛的用途。利用柠檬酸根与Ca2⁺能形成可溶性络合物的特性，用作抗凝血剂和输血剂，保存和加工血制品。枸橼酸钠与血液或血浆中的Ca2⁺结合形成难以离解的可溶性的枸橼酸钙，使血液中Ca2⁺减少，从而抑制凝血过程，产生抗凝作用，而且对红细胞有保护作用，可防止溶血的发生。

文献报道测定枸橼酸盐的含量可采用的方法有HPLC法、RP-HPLC法等；测定腺嘌呤的含量，可采用的方法有紫外分光光度法、HPLC法等。在化学药品地方标准上升国家标准（第三册），编号为WS-10001-(HD-0230)-2002的标准中，以用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-磷酸盐缓冲液[取磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·12H₂O）4.5g，磷酸二氢钠（NaH₂PO₄·2H₂O）1.6g，二硫酸四丁基胺0.3g，加水900ml溶解，用磷酸调节pH值至2.5，加水至1000ml（100:400）为流动相；检测波长为230nm。该法需要用到特殊试剂二硫酸四丁基胺，而且在该流动相条件下，腺嘌呤基本没有保留，同时枸橼酸容易拖尾等问题，从而影响结果的准确性。

赛默飞推出的方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，磷酸二氢钠溶液-甲醇(90:10)作为流动相对枸橼酸和腺嘌呤同时进行含量测定。经验证，该方法精密度好、回收率较高。相较原来的方法，腺嘌呤保留更强，分离度好，试剂更经济环保，可应用于红细胞保存液中枸橼酸和腺嘌呤的同时含量测定。

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