2024-05-20 09:50:19 赛默飞色谱与质谱分析
柴瑞平, 冉良骥
菊花,我国传统中药之一,收录于2020版中国药典[1],化学成分多样,主要有黄酮类、挥发油、苯丙素类、萜类、氨基酸等,其中黄酮和苯丙素类化合物为最主要的药效成分[2],在药典中选以绿原酸(C16H18O9)、木犀草苷(C21H20O11)、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸(C25H24O12)含量测定为菊花的质量评价指标。
本应用以药典品种菊花为例,首先复现其2020版中国药典含测方法,用于实际样品的质量评价;此外,还积极探索了Vanquish Access液相色谱仪与变色龙Chromeleon 7.3.2软件在中药分析中方法转换、VWD不停泵光谱扫描、光谱库自建与辅助定性、eWorkflow智能电子工作流的应用,可行性高,为药物分析工作者提供了更多实用的智能工具。
(货号:VA-S22-A-01)
四元泵Quaternary Pump AN
自动进样器Autosampler AT
柱温箱Column Compartment A
可变波长紫外检测器Variable Wavelength
Detector A(配11μL流通池)
图 2. 348 nm波长下基于药典方法采集的典型色谱图
(A: 混合对照品溶液 B: 中药菊花样品溶液)
图 3. 348 nm波长下基于加速方法采集的典型色谱图
(A: 混合对照品溶液 B: 中药菊花样品溶液)
*更多方法学数据请参考附件应用报告
可变波长检测器(VWD)光谱扫描(流速保持)和自建光谱库
当实验中使用可变波长检测器时,分析工作者可能无法直接对无对照品指认的色谱峰进行快速指认,主要受限于VWD无法直接获得与二极管阵列检测器DAD一样的3D光谱图,以便任意时间点任意色谱峰的光谱提取。Vanquish Access HPLC 系统的 VWD 检测器提供两个单波长通道用于监测,但也可以扫描特定保留时间的波长范围。
图 4. Vanquish Access VWD 执行光谱扫描参数设置
(以扫描菊花样品中29.70min的色谱峰为例)
图 5. 通过样品色谱峰在线扫描结果与光谱库对照品光谱比对进行3, 5-O-二咖啡酰基奎宁酸色谱峰指认
智能执行药典质控方法的电子工作流程eWorkflow
Chromeleon CDS 具有使用电子工作流程的技术优势,这些工作流程包含特定项目的与仪器、处理和报告方法相关的预定义序列设计。此外,还包括相关文档,例如应用报告和色谱柱使用维护手册等(图 6)。
图 6. 基于药典方法的菊花多成分含量测定的
eWorkflow内容展示
本次实验中使用中药菊花作为示例样品,首先,我们在不改变 2020版中国药典方法的情况下,展示了Vanquish Access液相色谱仪稳定可靠的性能。其次,在该平台上对符合药典要求的方法转换、VWD谱图扫描、自建光谱库和辅助表征、电子工作流程等功能进行了测试和验证。
Vanquish系列液相色谱系统现可向中药行业提供全面、可靠、创新型解决方案,涵盖中药材与饮片、中药配方颗粒、中药经典名方、中成药等应用品种,贯通中药科研-新药研发-中药质控等全链条成分分析的各个环节。
[1]中华人民共和国药典委员会.中国药典(一部),2020,323
[2]张伟,丁杨飞,陈慧芳,等.菊花道地性成因及研究进展[J].安徽中医药大学学报, 2023, 42(1):98-104.
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