液相色谱之药用辅料检测

HPLC-UV方法：

紫外检测器用于检测具有特定吸收波长，并在该波长下响应值（A）与浓度（C）成正比的物质。许多药用辅料如醇类、酮类、酯类、酚类等都具有紫外吸收性质，因此针对这类辅料HPLC-UV是首选方法。

用紫外检测器的高效液相色谱法测定野木瓜注射液中苯甲醇的含量，此种方法测得苯甲醇在线性范围内线性关系良好，且操作简便、准确、重复性好，为芳香醇类辅料应用此法检测提供了参考。另外，柠檬黄、苋菜红等是常用的人工合成色素，主要用作胶囊壳和糖衣的着色剂。原来的标准采用三氯化钛滴定法测定含量，操作繁琐费时，测定结果误差较大。有报道用紫外检测器测定药用辅料柠檬黄，测得结果线性范围宽，样品处理简单，试验方法灵敏度高、专属性强，试验结果准确可靠，提高了检验效率。可用于药用辅料色素的含量测定，为含芳香结构的色素辅料测定提供了参考。

HPLC-RID方法

示差折光检测器（RID）是一种最早应用于HPLC 的通用型检测器。其在聚合物、糖类、有机酸、甘油三酯、高分子化合物、脂肪烷烃等物质测定方面具有独特的优势。辅料中糖类、酯类物质种类多，用途广泛，因此HPLC-RID法在药用辅料检测中也发挥着重大作用。

RID是通过比较折光率的变化来检测流动相中的样品峰。对于无紫外吸收或只有紫外末端吸收的物质，用HPLC-UV检测时灵敏度相对较低，同时易发生基线噪音大，而用HPLC-RID法可取得较为理想的结果，但是RID 对多数检测物质（除糖类检测限可达1×10-8g/mL）检测灵敏度较低（约1×10-5g/mL），对环境温度、流动相组成的微小变化非常敏感，必须控温，且不适于梯度洗脱，这些固有的缺陷在某种程度上限制了其应用。

HPLC-ELSD方法：

目前蒸发光散射检测器（ELSD）越来越多的作为通用型检测器用于HPLC。其最大的优越性在于能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂，并能在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物。这些优势为其在药用辅料检测应用奠定了良好的基础。

ELSD 对所有不挥发溶质都有响应，是一种较理想的通用检测器。相比于同为通用型检测器的RID，其灵敏度高，检出限约为10 ng，不受溶剂成分及温度波动的影响，亦可用于梯度洗脱。其最大的缺陷在于其流动相需采用挥发性的盐（如醋酸盐、甲酸盐），对于一些挥发性比较强的成分，可能在较高的温度下会随着流动相挥发成气体状态，不适于用HPLC-ELSD检测。

HPLC-MS方法：

MS是强有力的结构解析工具，能为结构定性提供较多的信息，作为理想的色谱检测器，不仅特异性强，而且具有极高的检测灵敏度。LC-MS联用技术突破了过去对含量低、不易分离或缺乏紫外吸收的物质难于检测的瓶颈，成为药物鉴定分析的重要研究手段。不需衍生化步骤，可以直接分析不挥发性化合物、极性化合物、热不稳定化合物和大分子化合物。以上MS的优势也成为了其在药用辅料检测中得到迅速推广。

若通过衍生化的方法将样品组分制备成具有紫外吸收或能发出荧光的物质，用紫外、二极管阵列或荧光检测器，分析灵敏度可大大提高，定量水平达到0.01g/L数量级，但样品制备操作繁杂。

随着MS 技术的成熟与开发，复杂基质中样品的原位与直接分析，多样品的结构解析，有关物质的分析等都是MS 的主要应用方向。这些应用方向均与提高药用辅料质量标准的要求相契合。

HPLC-ICP-MS方法：

高效液相色谱- 电感耦合等离子体质谱联用技术（HPLC/ICP-MS）作为微量元素的测定最有效的途径之一，HPLC 高分离度与ICP-MS低检测性、宽动态线性范围及能同时测定多种元素、跟踪元素的变化等特点融合，目前已广泛的用于食品、环境、体内外药物分析中微元素的测定。

该方法应用于药用辅料中微量元素砷、汞、铬等检测的探索性研究项目已在试验室开展，随着技术的成熟与仪器的发展，其在药用辅料检测中有着广泛的应用前景。