蛋白酶去除小妙招

亲，GST标签酶切后，酶你是怎么去除的啊？

你用哪个酶切的？

PreScission Protease。

PreScission自身是带有GST标签的，所以，同样过Glutathione Sepharose即可，可以一次性把切下来的GST标签和PreScission酶全部结合去掉。

哇，这么方便！那如果是其他酶呢？

敲黑板

具体用哪种酶切是根据你选择的是哪个表达载体，不同载体，酶切序列不同。目前，市面上常见的是三类商品化的载体：

载体名称

对应的蛋白酶

pGEX-6P-1

pGEX-6P-2

pGEX-6P-3

PreScission Protease

pGEX-4T-1

pGEX-4T-2

pGEX-4T-3

Thrombin （凝血酶）

pGEX-5X-1

pGEX-5X-2

pGEX-5X-3

Factor Xa

（凝血因子Xa）

其切割和去除方式如下：

Benzamidine是个什么柱子？

这个是苯甲脒柱子，他可以结合很多凝血酶类，所以可以吸附去掉Thrombin和Factor Xa。将这根柱子和GSTrap串联，能很方便的一起去掉切下来的GST标签和酶。

原来如此。

其实不仅是切标签的时候，如果你的样品中含有容易降解你的目的蛋白的蛋白酶，也可以先过一个Benzamidine柱子吸附掉这些蛋白酶，对于保护样品稳定也是很好的方法。

哇，今天又学到不少！

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